第一节 蛋白质的提取和分离1．了解提取生物大分子的基本思路和方法
2．尝试蛋白质的提取
一、蛋白质分离提纯技术将生物体内的蛋白质提取出来并加以分离，就可以得到高纯度的甚至是单一种类的蛋白质
1．蛋白质分离提纯技术包括离心技术、层析技术和电泳技术等
其中，电泳技术最为快捷灵敏、简便易行
2．电泳原理蛋白质含有游离的氨基和羧基，是两性电解质，在一定 pH 条件下带有电荷
作为带电粒子，蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动，这就是电泳现象
蛋白质所带的电荷数越多，移动得越快；电荷数相同时，相对分子质量越小，则移动越快
3．不同蛋白质的混合溶液，在经过同一个电场电泳后，会在凝胶上形成不同的带纹
每一种带纹可能就是一种蛋白质
将这些带纹一个一个地剪下来，分别予以洗脱，然后对洗脱液中的蛋白质做进一步的分离
如果待测洗脱液不能再分离，则这个带纹中很可能含有一种单纯蛋白质
如果待测洗脱液还能再分离，则这个带纹中含有多种蛋白质，需要作进一步分离，直至提纯
二、血清蛋白的提取和分离1．新鲜血液在体外凝固后，会析出清亮的淡黄色液体——血清
血清中含有丙种球蛋白、凝集素等多种蛋白质
2．过程（1）点样：取新制血清与蔗糖溶液及溴酚蓝指示剂等体积混匀后，小心加到电泳样品槽的胶面上
（3）染色：取出凝胶，放入考马斯亮蓝 R250染色液中
染色与固定同时进行，使染色液没过胶板，染色 30 min
（4）脱色：用醋酸溶液浸泡漂洗数次，每隔 1～2 h 更换脱色液，直至底色脱净，背景清晰
（5）制干胶板：将已脱色的凝胶板放在保存液中浸泡 3～4 h，然后放在两层透气玻璃纸中间，自然干燥即可获得血清蛋白的电泳谱带
三、其他蛋白质的提取与分离1．牛奶中酪蛋白的提取与检测当 pH＝4
8 时，酪蛋白的溶解度降低，并析出沉淀
用酒精除去酪蛋白沉淀中的脂肪后，即得到纯的酪蛋白
酪蛋白中含有
