植物叶绿体中叶绿素的提取与分离用具:剪刀一把、干燥的定性滤纸、50ml 的烧杯及 100ml 的烧杯各 3 个、白纸 3 张、试管架一个、研钵一个、玻璃漏斗一个、尼龙布或纱布、毛细血管一只、药勺一个、10ml 量筒一只,天平一只,试管 3 支、纸板一块、棉塞 3 个、培养皿 3 个、刻度尺、注射器一只、盖玻片试剂:丙酮、无水乙醇、层吸液(20 份石油醚、2 份丙酮、1 份苯配置而成)、二氧化硅、碳酸钙、碳酸钠材料:新鲜的菠菜叶、青菜叶、大叶黄杨叶片背景资料:1、 叶绿素等是脂溶性的有机分子,根据相似相溶的原理,叶绿素等色素分子溶于有机溶剂而不溶于有极性的水
故在研磨和收集叶绿色素时要用丙酮或乙醇等有机溶剂而不用水
2、 叶绿素分布于基粒的片层薄膜上,加入少许二氧化硅是为了磨碎细胞壁、质膜、叶绿体被膜和光合片成,使色素溶解于丙酮中
3、 破碎的细胞中含有草酸等有机酸,叶绿素分子中含有的 Mg 元素处于不稳定化合太,镁离子与有机酸结合将导致色素分子破坏
加入少许碳酸钙使得钙离子与有机酸结合,减少镁离子的转移,防止研磨时叶绿体色素的破坏
所以在研磨时加入适量的碳酸钙 ,同时加入碳酸钠的道理亦如此
4、 在过滤时选用脱脂棉或纱布,而不用滤纸
原因主要有下:1、色素分子比较大,不容易透过滤纸;2、滤纸有较强的吸附性而使色素吸附在滤纸上,从而降低色素浓度,影响实验效果;3、叶绿素是脂溶性,根据相似相容的原理,脱脂棉可以减少实验过程中色素的流失,增强实验效果
5、 根据物理学中的毛细现象,画滤纸细线前滤纸必须经过干燥处理,是为了阻止水分子堵塞滤纸中的毛细管而影响层析液的扩散
但如果用火烤的话,会使滤纸纤维变形同时破坏啦毛细管,而影响层析液的扩散
6、 由于液面的不同位置表面张力不同,纸条接近液面时,其边缘的表面的张力较大,层析液沿滤纸边缘扩散过快,而导致色素带分离不整齐的现象