溶血实验一,实验目的1、学习引起红细胞溶解的各种方法,观察溶血现象
2、了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度
二,实验原理将红细胞放在低渗盐溶液中,水分子大量渗到细胞内使细胞涨破,血红蛋白释放到介质当中,介质由不透明的细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液(此时的细胞膜收缩,会略有不溶性内容物),这种现象称为溶血
红细胞在等渗盐溶液中短时间之内不会发生溶血,但是由于红细胞的细胞膜对不同物质的通透性不同,时间久了,膜两侧的渗透压平衡会被打破,也会发生溶血
由于各种溶质透过细胞膜的速度不同,因此发生溶血的时间也不相同
发生溶血现象所需的时间,可以作为测量某种物质进入红细胞速度的指标
即溶血时间对应着穿膜速度三,实验材料和试剂鸡血、试管若干、移液管若干、洗耳球、0
85%NaCl溶液、0
085%NaCl溶液、0
8mol/L(0
3Mol/L等渗)甲醇溶液、0
8mol/L(0
3Mol/L等渗)丙三醇溶液、6%(5%等渗)葡萄糖溶液、2%(1
5%等渗)TritonX-100四,实验步骤1,取鸡血7ml,加入0
85%的NaCl溶液3mL,在1000r/min条件下离心5分钟
(RBC压积量不少于0
6mL)2,剩余沉淀量1ml左右,将上述离心后的剩余红细胞按照沉淀量配成50%浓度(总体积应不少于1
2mL)每组取6支试管,分别加入如下溶液3mL(1)0
85%NaCl溶液(2)0
085%NaCl溶液(3)0
8mol/L(0
3Mol/L等渗)甲醇溶液(4)0
8mol/L(0
3Mol/L等渗)丙三醇溶液(5)6%(5%等渗)葡萄糖溶液(6)2%(1
5%等渗)TritonX-1004,向上述6支试管中分别加入50%红细胞悬液3滴,轻轻摇匀,(4)(5)号试管在加入红细胞悬液后,立即混匀,制片
观察0min时的微观情况
并且之后(4)号试管每10分钟观察记录一次微观情