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甘油三酯TG测定操作规程SOPVIP免费

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甘油三酯(TG)测定操作规程(SOP)一、用途体外定量测定血清、血浆样品中甘油三酯(TG)的含量。二、临床意义(一)概述甘油三酯(TG)分子量约为885道尔顿,是血液中主要的脂质成分,主要参与体内能量代谢。(二)临床意义甘油三酯是最常用的高脂血症筛查指标。甘油三酯升高常见于糖尿病、肾病综合征、脂肪肝及其他肝病、SLE、胰腺炎、糖原累积病等。妊娠中后期TG升高。先天性脂蛋白脂肪酶缺陷时TG异常升高。甘油三酯降低见于甲状腺功能低下,肾上腺皮质功能降低和肝功能严重低下。甘油三酯与HDL-C间呈负相关,而HDL-C和冠心病的流行呈负相关。测定血清TG评估HDL-C降低是否由于血中TG过多引起,以制定治疗方案有意义。血清TG>2.8mmol/L时,HDL-C下降的机会增大。(三)医学决定水平0.45mmol/L:此值在正常下限附近,低于此值多与营养不良有关,应进行正确的诊断和治疗。1.69mmol/L:年轻男性此值接近参考范围上限,为动脉粥样硬化性心血管的一个危险因子,应给予病人提供合适的预防建议。4.52mmol/L:高于此水平常预示会发生动脉粥样硬化性心血管疾病,应给予适当治疗,如控制饮食和用降脂药物等。三、检验原理LPL甘油+脂肪酸甘油三酯+H2O3-磷酸-甘油+ADP甘油+ATPGK磷酸二羟丙酮+H2O23-磷酸-甘油+O2GPO醌亚胺+H2OH202+4-AAP+4-氯酚POD醌亚胺的生成使505nm波长处吸光度上升,吸光度的变化与TG的含量成正比。通过与同样处理的甘油三酯校准品比较,即可计算出样品中TG的含量。四、样品血液样品原则上采集空腹血(禁食12小时);患者处于平静、休息状态,减少患者由于运动、饮食带来的影响;静脉采血时患者应取坐位或卧位;止血带使用后1分钟内采血,回血后立即松开;正确使用抗凝剂;防止溶血;防止过失性采样。样品运送过程中应防止过度振荡、防止样品容器的破损、防止样品被污染、防止样品及唯一性标志的丢失和混淆,防止样品对环境的污染、水分蒸发。TG测定样品为空腹不溶血的血清、血浆(肝素或EDTA抗凝)。样品应在低温条件下运输保存,样品中TG在2~8℃保存可稳定7天,-20℃保存可稳定数月。五、试剂(一)试剂组成R:试剂脂蛋白脂酶(LPL)甘油激酶(GK)4.5KU/L1KU/L甘油磷酸氧化酶(GPO)2KU/L辣根过氧化物酶(POD)2KU/L4-氨基安替比林0.3mmol/L(4-AAP)甘油三酯校准品标示值见瓶签不同批号试剂中各组份不能互换。(二)试剂准备试剂为即用型液体试剂,开瓶装载即可使用,用后应及时冷藏保存。(三)试剂的保存及稳定性1.不能冰冻试剂。2.未开瓶的试剂应在2~8℃密闭避光贮存,稳定期为瓶签标示的有效期。开瓶后的试剂应在2~8℃保存,稳定期为30天。(四)试剂性能可接受的指标空白吸光度:试剂空白在波长505nm处,10mm光径下,吸光度值≤0.500。(五)试剂使用中的注意事项1.严格按照试剂说明书的要求使用试剂。2.试剂2~8℃密闭避光贮存可稳定至瓶签标示的有效期。对超过有效期的试剂不能使用。3.严禁放置0℃以下保存。4.试剂开瓶后,如果长期放置,会吸收空气中的二氧化碳,导致pH值下降,造成测定值不准确,因此请尽快使用。5.当试剂变混浊或被污染或空白吸光度值>0.500时,表明试剂已失效,应弃去。(六)预防危险发生的注意事项使用时应避免与人体接触,当试剂误入口中或眼中,或者附着到皮肤上的时候,请立即用大量清水冲洗,如有必要,请接受医生的治疗。(七)处理废弃物时的注意事项试剂反应后所产生的废液及使用后的包装材料应集中收集后按照相关法规进行废物处理。六、操作步骤1.基本参数方法:终点法样品/试剂:1/100主波长:505nm反应温度:37℃副波长:none2.操作加入物样品(μl)校准品(μl)空白(B)校准(C)测定(U)------3--3003----300反应时间:10min蒸馏水/生理盐水(μl)3试剂R(μl)300混匀,37℃恒温10分钟,505nm波长处以空白管调零测定吸光度A。3.操作流程图4.计算样品TG含量(mmol/L)=七、参考值范围0.52-1.70mmol/LAuAc×CcR:300μl样品:3μl时间:空白调零温度:37℃10分钟主波长:505nm副波长:none测定读数八、注意事项(一)本试剂尽管具有较好的抗交叉污染能力,但仍应根据仪...

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