凝血四项操作规程VIP免费

凝血四项操作规程昆仑泌尿外科医院检验科临检室作业指导书主题内容凝血四项操作规程文件编号；SZKL-LJ-03版本/修订号；1/0生效日期：20150101页码；第1页共5页凝血四项操作规程1.目的规范凝血四项（PT、APTT、TT、FIB）的测定。2.实验原理凝固法原理：在确定量的血浆样本经过一定时间的加温后，加入试剂后，采用波长为660nm的光照射样本。凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中血的浑浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定。从散射光光强度的测定，可以做出凝血曲线，通过PercentageDetectionMethod法求得血液凝固时间。3.标本要求3.1.标本准备：采用塑料采血管或硅化玻璃注射器静脉采血，针头必须为21号以上，儿童可用23号。采血技术熟练，采血时止血带不可束缚过紧，并且以1分钟完成为宜，最多不宜超过3分钟以免某些凝血因子及纤溶因子活化。3.2.抗凝剂选择：以109mmol/L枸椽酸钠溶液为佳，血与抗凝剂按9：1混合。建议用已加有抗凝剂的硅化真空采血管。也可用带盖塑料管或硅化玻璃管，但应保证血与抗凝剂的比例正确。3.3.收到血标本后应尽快离心分离血浆，并尽快测量，全血储存在4-8℃不应超过2小时，室温下富含血小板血浆可存放3小时，去血小板血浆可存放2小时；4小时内不能测定的血浆应冷藏；不要把血浆置于37℃条件下超过10分钟。应了解不同存放温度和时间对各种凝血因子活性检测的影响。4.材料4.1.试剂的选择一方面要根据所用检测仪器，例如：光电检测法的凝血仪不宜用透光度差的试剂；另一方面要根据实验试剂对疾病的敏感性，例如APTT试剂中所用活化剂不同（可用白陶土、硅藻土和鞣花酸），该试剂对肝素、凝血因子Ⅷ和因子Ⅸ缺乏及狼疮样抗凝物敏感性不同，所以需根据检测项目来选择不同活化剂。(例如常用的APTT试剂的活化剂，以白陶土对凝血因子敏感，硅土对因子及肝素均敏感，鞣花酸对狼疮样抗凝物敏感性较强.PT试剂的选择也一样,例如对口服抗凝药物(华法令)检测应选择ISI与1.0接近的PT试剂。)血栓与止血检验应尽可能选用仪器生产厂家推荐的配套试剂，并选择使用与仪器原理相匹配的试剂。4.2.正常对照血浆：正常对照血浆有商品供应，多为冻干品，也可自制，要求采集20份以上男女各半，年龄在18-25岁之间的健康个体，删除服药者，须在平静状态下采血，血液经抗凝离心后分离血浆。取等量的各份个体血浆进行混匀，然后分装小瓶，冻存于-80℃或冷冻干燥备用。4.3.参比血浆或称标准血浆（质控血浆）：为了使检测结果在同一实验室的不同时期或不实验室间具有可比性，就要使用标准品。5.仪器与试剂5.1仪器：深圳锦瑞CA-54半自动化血凝分析仪。5.2试剂：上海太阳生物技术有限公司。5.3仪器安装后应对其主要性能参数进行评价，内容包括精密度、线性范围、可比性、抗干扰试验试验等。评价结果应在仪器说明书标示范围之内。1/5凝血四项操作规程文件编号；SZKL-LJ-03版本/修订号；1/0生效日期：20150101主题内容凝血四项操作规程页码；第2页共5页5.4仪器在测定常规标本前应使用配套的校正物建立标准曲线，在更换新批号的试剂或仪器维修后，要重新建立标准曲线。无校正物的测定项目，可伤使用配套的定值质控物进行测定，测定结果应在定值质控物标示的允许范围内。5.5每台仪器上使用的凝血活酶试剂应有特定的ISI（国际敏感指数）值，这样才能使患者INR（国际标准化凝血酶原时间）比值的结果有可比性。自动终点测定目前得到广泛应用，仪器有半自动和全自动两种类型。仪器应用的检测系统有化学的、机械的或电子等，形成凝块所需时间也有差异。对每种方法都应建立自己正常参考范围，一些光学系统进行测定的仪器对血脂高、溶血、黄疸血浆不易得出精确的检测结果。6.操作步骤昆仑泌尿外科医院检验科临检室作业指导书6.1PT检测步骤6.1.1打开电源开关，仪器自检后进入主菜单页面，然后按“1”进入“测量标本”子菜单。6.1.2设置测试项目和病人编号：按”1“键设置测试项目，按“←”“→”选择“PT”，确认请按“确认/ENTER”键，取消请按“菜单/MENU”键。按“2”键设置病人编号，直接输入病人号后，确认请按“确认/ENTER”键，取消请按“菜单/MENU”键。6.1.3将PT应用试剂根据测试样本...