回补维生素E对维生素E缺乏不孕大鼠妊娠结局的影响郎摘'2,贺斌2,王丽丽'2,王介东'2·(1.北京协和医学院研究生院.北京1oo73o;2.国家卫生计生委科学技术研究所.北京【摘要】目的研究在植入过程回补维生素E对维生素E缺乏不孕(VED)大鼠妊娠结局的影响。方法从出生后l1d开始喂养维生素E缺乏的食物,喂养6个月后建立VED大鼠模型。在模型大鼠交配后5.5d、6.5d、75d分别灌胃500mg/kg的维生素E回补,以非VED大鼠为对照组,在回补0h、4h、8h、l2h、l6h、20h和24h观察维生素E的浓度变化,并于交配后l9.5d统计大鼠子宫的着床点个数、活胎个数和胎鼠体重变化。结果VED大鼠在回补4h后血浆中维生素E的浓度为l354土38lµg/m1,达到正常水平;分别在交配后5.5d、6.5d、75d回补维生素E的VED大鼠妊娠率分别为80%、60%、40%(对照组均为l00%),着床点个数分别为9.3土l.l、8.5土0.5和84土l.4(对照组为l27土05、l30土22和l2.7土l.2),活胎个数分别为5.0土2.0、4.0土23和20土24(对照组为l23土0.5、l27土24和ll.3土l.7),均显著低于对照组(P<0.05);交配后5.5d回补组胎鼠体重与对照组相比无统计学差异(P>0.05),交配后6.5d和75d回补组胎鼠体重显著低子对照组(分别为l.74土055g和l.63土068gvs.2l6土0l8g和2l9土02lg)(P<0.0l)。结论在植入过程回补维生素E可部分挽救由子维生素E缺乏所导致的不孕;随着回补时间的延后,回补维生素E对妊娠结局挽救的效果明显下降。【关键词】维生素E;妊娠结局;植入Evans等在上世纪20年代发现缺乏维生素E可以导致大鼠不孕。维生素E是一类妊娠过程不可或缺的营养元素,缺乏维生素E会引起早产、流产、先兆子痫和胎儿子宫内生长受限。维生素E在体内的减少是一个非常缓慢的过程,建立维生素E缺乏的动物模型需要很长的时间。研究维生素E最常用的动物是大鼠。维生素E缺乏导致不孕的雌性大鼠卵巢和排卵过程没有受到影响,但在妊娠过程中出现吸收胎;而雄性大鼠的精子发生过程异常,导致精子减少或无精。维生素E的研究一直主要围绕生殖过程,但维生素E在妊娠过程中的作用阶段及相关分子机制还不清楚,需要进一步研究探讨。本研究以维生素E缺乏的不孕大鼠为研究对象,探究植入过程中回补维生素E对其妊娠结局的影响。材料与方法一、材料1.实验动物:SPF级Wista幼鼠鼠龄为出生后10d,共10窝,每窝10只;SPF级Wista雄鼠9~10周龄,共20只,购自北京协和医学院实验动物中退出全屏心,光周期调控:06:00~18:00光照,18:00~06:00黑暗,恒温(21土1)℃、恒湿(55%土5%)条件下饲养,自由取食饮水。2.饲料配制及维生素E检测:饲料委托京维通利华实验动物技术有限公司加工合成,经第三方检测机构北京谱尼测试科技有限公司测试,正常饲料中维生素E含量是154mg/kg,维生素E缺乏饲料中维生素E的含量<0.5mg/kg。正常饲料配方(%):酪蛋白20,蛋氨酸0.3,葡糖675,猪油5(Corn0i1,tocophero1-stripped替代),纤维素3,矿物盐3.5,碳酸钙035，复合维生素035。维生素E缺乏饲料配方(%):酪蛋白20,蛋氨酸03,葡葡糖67.5,猪油5(Corn0i1,tocopherolstripped替代),纤维素3,矿物盐3.5,碳酸钙035,复合维生素(缺维生素E)035。(天然型)维生素E软胶囊(100mg/粒,浙江医药股份有限公司新昌制药厂)。维生素E检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)二、方法1.建立维生素E缺乏大鼠不孕模型:仔鼠出生后第11天开始给母鼠分别喂养正常饲料(对照组)和维生素E缺乏饲料(VED饲料组),并对仔鼠进行称重,每周称重一次;第21天离乳后,两组中的雌性仔鼠继续喂养相应的正常饲料和维生素E缺乏饲料,观察生长过程中体重的变化;喂养21周后,两组雌鼠仔继续喂养相应的正常饲料和维生素E缺乏饲料，观察生长过程中体重的变化；喂养24周后，两组雌鼠和雄鼠进行第一轮交配,在16:00将雌鼠与正常的雄鼠进行第一轮交配。在16:00将雌鼠和雄鼠放在交配笼里,次日8:00在交配笼下的托盘中看到阴栓,为交配成功,记为0.5d,其中,交配成功没有产下仔鼠的VED饲料组雌鼠定义为维生素E缺乏不孕大鼠(VED组)。2.维生素E回补实验:对照组和VED组大鼠分别进行第二轮交配,在16:00将雌鼠和正常雄鼠放入交配笼中,次日8:00见阴栓为交配成功,记为05d,进行以下处理:(1)对照组和VED不孕组孕鼠各随机留取15只,分别在55d、65d和75d(5只/d)处...
