用相差显微镜观察口腔上皮细胞细胞生物学实验实验目的1.了解相差显微镜观察活细胞的基本原理
2.了解相差显微镜的特殊组件和位置
3.掌握调节相差显微镜的基本步骤
实验原理•人的眼睛能感知光强弱(振幅)和颜色(波长)的变化,但不能感知光相位的变化
•活细胞大多数高度透明,光波通过时不被吸收,其振幅和波长基本不变,即光强弱和颜色改变很少,人眼睛几乎感觉不到
•相差显微镜可将光相位的变化转变为振幅的变化,从而使看不清的活细胞结构成为可见
相差显微镜原理及结构相差显微镜的部件环状光阑•环状光阑是在玻璃片上喷涂金属薄膜借以挡光,只留下环形透光窄缝的光阑
它能使来自反光镜的直射光只能从环状部分通过,形成一个空心圆筒状的光柱,经聚光器并照射到标本以后,就产生两部分光,一部分是直射光,另一部分是经过标本后产生的衍射光,这两部分光经物镜内相板的作用而改变了光的相位和振幅
•在相差聚光器下面装有一个转盘,盘上镶有宽狭不同的环状光阑,在不同光阑边上刻有10×、20×,40×等字样,这表示当用不同放大倍数的物镜时,必须配合相应的环状光阑
麦克奥迪BA200显微镜相差显微镜的使用相差显微镜实验方法和步骤•安放相差装置取下原有聚光器和物镜,分别安上相差聚光器和相差物镜,并将转盘转到“0”标记的位置
用10×相差物镜调光
•合轴调节取下原有目镜,换上合轴调整望远镜
上下移动望远镜筒,至能看清物镜中的相板环为止
•放回目镜取下合轴调整望远镜,放回目镜即可进行观察
更换不同放大倍数的相差物镜时,每次都要按上述方法重新调节
材料与试剂(一)仪器相差显微镜
(二)材料口腔上皮细胞,载玻片,盖玻片,牙签,滤纸条和指甲油
(三)试剂生理盐水
样品制备在一张清洁无痕的载玻片上滴一小滴生理盐水,用牙签刮自己的口腔粘膜少许与生理盐水混匀,盖上清洁的盖玻片,用滤纸条吸掉盖片周围多余的水分
相差显微镜观