植物细胞有丝分裂的制片与观察一、实验目的1
掌握植物根尖细胞有丝分裂制片技术2
观察植物细胞有丝分裂过程中染色体的形态特征二、实验原理1
植物根尖、茎尖等分生区细胞能进行有丝分裂2
在有丝分裂过程中,染色体发生规律性动态变化3
染色体可被碱性染料着色,便于观察4
根据显微镜下观察到的染色体特点可识别有丝分裂不同时期三、实验仪器和药品1
仪器:显微镜、恒温箱、水浴锅、计时器、烧杯、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、滴管、刀片、玻璃皿2
材料:大蒜3
药品:诺卡氏固定液1mol/L的HCl作为解离液、卡宝品红作为染色液四、实验流程1
大蒜根尖培养及固定:实验前3-4d,将大蒜掰成蒜瓣摆在铺有四层纱布的托盘里放入温度为25℃,一定湿度的培养箱中培养,每天换水两次待根长到1~2cm将根剪下用吸水纸吸干水分,将其放入诺卡氏固定液(乙醇:冰醋酸=3:1)固定4~24小时
固定的作用:杀死细胞,固定细胞形态,维持染色体的完整性,提高染色效果四、实验流程1
大蒜根尖培养及固定2
装片制作(1)解离目的:使组织中的细胞分离开操作:先用95%的酒精漂洗,在HCL中60℃水浴5min左右(c)解离时,细胞已死亡(a)解离充分是实验成功的必备条件注意:(b)解离过度,细胞结构被破坏解离液:1mol/L的HCl四、实验流程1
大蒜根尖培养及固定2
装片制作漂洗液:清水(先置于清水中浸泡2min左右)目的:洗去解离液,便于染色次数:2-3次注意:若不漂洗解离过度(HCl作用)影响染色(HCl与碱性染料反应)(1)解离(2)漂洗备注:将漂洗好的根尖放入盛有清水的培养皿中四、实验流程1
大蒜根尖培养及固定2
装片制作(1)解离(2)漂洗(3)取材部位:根尖2-3mm注意:要去除根尖乳白色根冠(根尖分生区)成熟区伸长区分生区根冠根尖的结构四、实验流程1
大蒜根尖培养及固定2
装片制作(1)解离(3)取材(2)漂洗