内容第一节玻璃器皿及塑料制品的清洗与消毒第二节培养操作的基本要领和要求第三节细胞培养的基本技术第一节第一节细胞培养所用玻璃及塑料细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒制品的清洗与消毒一、清洗一、清洗目的：目的：在组织细胞培养中，体外细胞对任何在组织细胞培养中，体外细胞对任何有害有害物质物质都非常敏感都非常敏感,,均能影响培养细胞的生长均能影响培养细胞的生长有害物质包括有害物质包括：：微生物产品附带杂物微生物产品附带杂物上次细胞残留物上次细胞残留物非营养成分的化学物质非营养成分的化学物质需要清洗的培养用品需要清洗的培养用品玻璃器皿、胶塞、塑料制品玻璃器皿、胶塞、塑料制品11、玻璃器皿的清洗、玻璃器皿的清洗包括包括浸泡、刷洗、浸酸浸泡、刷洗、浸酸和和冲洗冲洗四个步骤四个步骤清洗后的玻璃器皿要求：清洗后的玻璃器皿要求：干净透明无油迹干净透明无油迹不能残留任何物质不能残留任何物质清洗：自来水洗，烘干泡酸自来水洗去离子水洗三蒸水洗烘干新瓶子均按该程序清洗，培养材料染菌的瓶子经高压灭菌后也按该程序清洗。酸液（洗液）：浓硫酸+重铬酸钾浸泡：浸泡：初次使用和培养使用后的玻璃器皿均需初次使用和培养使用后的玻璃器皿均需先用清水浸泡，以使附着物软化或被溶先用清水浸泡，以使附着物软化或被溶掉。掉。新的初次使用的玻璃器皿新的初次使用的玻璃器皿先用自来水简单刷洗，然后用先用自来水简单刷洗，然后用55％％稀盐稀盐酸液浸泡过夜酸液浸泡过夜，以中和其中的碱性物质，以中和其中的碱性物质培养瓶浸泡后还需要装满蒸馏水后培养瓶浸泡后还需要装满蒸馏水后上高压！！上高压！！再次使用的玻璃器皿：再次使用的玻璃器皿：用后立即浸入水中，要求完全用后立即浸入水中，要求完全浸入，不能留有气泡或浮在液浸入，不能留有气泡或浮在液面上。面上。原因：常附有大量刚使用过的蛋白原因：常附有大量刚使用过的蛋白质，干固后不易洗掉。质，干固后不易洗掉。刷洗：刷洗：用毛刷沾洗涤剂刷洗，以除去器皿表面附用毛刷沾洗涤剂刷洗，以除去器皿表面附着较牢的杂质。着较牢的杂质。刷洗要适度，过度会损害器皿表面光泽度刷洗要适度，过度会损害器皿表面光泽度浸酸：浸酸：玻璃器皿浸泡到清洁液中的过程玻璃器皿浸泡到清洁液中的过程注意：浸泡时器皿要充满清洁液，勿留气泡或器注意：浸泡时器皿要充满清洁液，勿留气泡或器皿露出清洁液面。皿露出清洁液面。浸泡时间：一般为过夜，不应少于浸泡时间：一般为过夜，不应少于66小时小时配制、浸泡时应注意安全，须穿戴耐酸手套和围裙，配制、浸泡时应注意安全，须穿戴耐酸手套和围裙，并要保护好面部及身体裸露部分。并要保护好面部及身体裸露部分。冲洗冲洗在使用后，刷洗及浸泡后都必须用水充分冲洗。在使用后，刷洗及浸泡后都必须用水充分冲洗。使之尽量不留污染或清洁液的残迹。使之尽量不留污染或清洁液的残迹。浸泡后的冲洗过程：浸泡后的冲洗过程：需流水冲洗十次以上，每次水须灌满及倒干净，需流水冲洗十次以上，每次水须灌满及倒干净，蒸馏水浸泡过夜，自来水冲洗蒸馏水浸泡过夜，自来水冲洗55遍，一蒸水遍，一蒸水55遍，遍，二蒸水二蒸水33遍，培养瓶要求二蒸水也用流水，烤干遍，培养瓶要求二蒸水也用流水，烤干备用。备用。22、胶塞的清洗、胶塞的清洗新购置的瓶塞带有大量滑石粉及杂质，应先新购置的瓶塞带有大量滑石粉及杂质，应先用自来水冲洗，再做常规处理用自来水冲洗，再做常规处理..常规清洗方法常规清洗方法每次用后立即置入水中浸泡，用每次用后立即置入水中浸泡，用2%NaOH2%NaOH或洗或洗衣粉煮沸衣粉煮沸10-2010-20分钟（以除掉培养中的蛋白质），分钟（以除掉培养中的蛋白质），自来水冲洗，蒸馏水冲洗自来水冲洗，蒸馏水冲洗2-32-3次，晾干备用。次，晾干备用。33、塑料制品的清洗、塑料制品的清洗塑料制品现多是采用无毒并已经特殊处理的塑料制品现多是采用无毒并已经特殊处理的包装，打开包装即可用，多为一次性物品。包装，打开包装即可用，多为一次性物品。必要时用必要时用2%N...
