实验三常用培养基的制备、灭菌与实验三常用培养基的制备、灭菌与消毒消毒实验目的:实验目的:1.1.了解培养基的配制原理了解培养基的配制原理2.2.掌握配制培养基的一般方法和步骤掌握配制培养基的一般方法和步骤培养基是人工配制的,适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质培养基是人工配制的,适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质原则:目的明确原则:目的明确;;营养协调营养协调;;控制控制PHPH、渗透压等条件、渗透压等条件;;经济节约经济节约方法:查阅文献方法:查阅文献;;精心设计精心设计;;试验比较试验比较步骤:称量、熔化、调步骤:称量、熔化、调PHPH、过滤、分装、、过滤、分装、加塞、包扎、灭菌、冷却、无菌检查加塞、包扎、灭菌、冷却、无菌检查培养基种类培养基种类::碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐、水碳源、氮源、能源、生长因子、无机盐、水一、按成份的不同划分一、按成份的不同划分天然培养基、合成培养基、半合成培养基天然培养基、合成培养基、半合成培养基二、按培养基的物理状态划分二、按培养基的物理状态划分固体培养基、液体培养基、半固体培养基固体培养基、液体培养基、半固体培养基三、按培养基用途划分三、按培养基用途划分基础培养基、加富培养基、鉴别培养基、选择培养基基础培养基、加富培养基、鉴别培养基、选择培养基牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。其配方如下:最普通的细菌基础培养基。其配方如下:牛肉膏牛肉膏3g3g,蛋白胨,蛋白胨10g10g,,Nacl5gNacl5g,琼脂,琼脂1155~~20g20g,水,水1000mL1000mL,,PH7.0PH7.0~~7.2(7.2(后后调调))高氏高氏11号培养基号培养基高氏高氏11号培养基是用于分离和培养放线菌号培养基是用于分离和培养放线菌的合成培养基。其配方如下:的合成培养基。其配方如下:可溶性淀粉可溶性淀粉20g20g,,KNO31gKNO31g,,NaCl0.5gNaCl0.5g,,K2HPO4·3H2O0.5gK2HPO4·3H2O0.5g,,MgSO4·7H2O0.5gMgSO4·7H2O0.5g,,FeSO4·7H2O0.01gFeSO4·7H2O0.01g,琼脂,琼脂1515~~20g20g,水,水1000mL1000mL,,pH7.4pH7.4~~7.67.6。。查氏合成培养基查氏合成培养基查氏合成培养基是用来分类和培养霉菌的查氏合成培养基是用来分类和培养霉菌的培养基培养基,,其配方如下:其配方如下:NaNO33g,K2HPO41g,KCl0.5g,NaNO33g,K2HPO41g,KCl0.5g,MgSO4.7H2O0.5g,FeSO40.01g,MgSO4.7H2O0.5g,FeSO40.01g,蔗糖蔗糖30g,30g,H2O1000ml,pHH2O1000ml,pH自然自然麦芽汁培养基麦芽汁培养基用来培养酵母菌用来培养酵母菌,,干麦芽粉加干麦芽粉加44倍水倍水,,在在550-60℃0-60℃保温糖化保温糖化3-43-4小时,用碘液试验检小时,用碘液试验检查至糖化完全为止查至糖化完全为止,,调整糖液浓度调整糖液浓度,,煮沸煮沸后,过滤,调后,过滤,调pHpH为为6.06.0。。消毒与灭菌消毒与灭菌消毒:消灭病原菌和有害微生物的营养体消毒:消灭病原菌和有害微生物的营养体灭菌:杀灭一切微生物的营养体,芽胞和孢子。灭菌:杀灭一切微生物的营养体,芽胞和孢子。方法:方法:物理的方法:加热、过滤、辐射物理的方法:加热、过滤、辐射化学的方法:用化学试剂抑制或杀灭微生物。主要破化学的方法:用化学试剂抑制或杀灭微生物。主要破坏细菌代谢机能。如重金属离子,磺胺类药物及抗坏细菌代谢机能。如重金属离子,磺胺类药物及抗生素等生素等。。加热法:加热法:干热法:火焰灼烧灭菌和热空气灭菌干热法:火焰灼烧灭菌和热空气灭菌11、火焰灼烧适用于接种环、接种针和金属用具如镊子等,试管、火焰灼烧适用于接种环、接种针和金属用具如镊子等,试管口和瓶口,涂布用玻璃棒。口和瓶口,涂布用玻璃棒。22、热空气灭菌利用高温干燥空气(、热空气灭菌利用高温干燥空气(160160--170C170C)加热灭菌)加热灭菌11--2h2h,适用于玻璃器皿和培养皿等。原理加热使蛋白质变性,,适用于玻璃器皿和培养皿等。原理加热使蛋白质变性,与水的含量有关,当环境和细胞含水量越大,凝固越快。与水的含量有关,当环...