课题课题22土壤中分解尿素的细菌的土壤中分解尿素的细菌的分离与计数分离与计数一、课题背景一、课题背景11、尿素的利用、尿素的利用尿素尿素是一种重要的是一种重要的农业氮肥。农业氮肥。尿素尿素不能直不能直接接被农作物被农作物吸收。吸收。土壤中的细菌将尿素土壤中的细菌将尿素分解成氨分解成氨之后才能被植物利用。之后才能被植物利用。22、细菌利用尿素的原因、细菌利用尿素的原因土壤中的细菌分解尿素是因为它们土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶能合成脲酶CO(NHCO(NH22))22脲酶脲酶+CO+CO222NH2NH33+H+H22OO44、课题目的、课题目的①①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌从土壤中分离出能够分解尿素的细菌②②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌的细菌一一..研究思路研究思路㈠㈠..筛选菌株筛选菌株㈡㈡..统计菌落数目统计菌落数目㈢㈢..设置对照设置对照11、实例：、实例：启示：启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。要求，到相应的环境中去寻找。原因：因为热泉温度原因：因为热泉温度7070～～808000CC，淘汰了绝大多，淘汰了绝大多数微生物只有数微生物只有TaqTaq细菌被筛选出来。细菌被筛选出来。DNADNA多聚酶链式反应多聚酶链式反应是是一种在体外将一种在体外将少量少量DNADNA大量复制大量复制的技术，此项的技术，此项技术要求使用技术要求使用耐高温耐高温（（939300CC）的）的DNADNA聚合聚合酶。酶。㈠㈠..筛选菌株筛选菌株22、实验室中微生物的筛选原理：、实验室中微生物的筛选原理：人为提供人为提供有利于目的菌株生长有利于目的菌株生长的条件的条件((包括包括营养、温度、营养、温度、pHpH等等))，同时，同时抑制或阻止其他抑制或阻止其他微生物微生物生长。也就是用选择性培养基筛选。生长。也就是用选择性培养基筛选。15.0g15.0g琼脂琼脂1.0g1.0g尿素尿素10.0g10.0g葡萄糖葡萄糖0.2g0.2gMgSOMgSO4`4`7H7H22OO2.1g2.1gNaHNaH22POPO441.4g1.4gKHKH22POPO4433、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：①①从物理性质看此培养基属于哪类？从物理性质看此培养基属于哪类？固体培养基固体培养基②②从用途看此培养基属于哪类？从用途看此培养基属于哪类？③③从化学成分看此培养基属于哪类？从化学成分看此培养基属于哪类？选择培养基选择培养基合成培养基合成培养基15.0g15.0g琼脂琼脂1.0g1.0g尿素尿素10.0g10.0g葡萄糖葡萄糖0.2g0.2gMgSOMgSO4`4`7H7H22OO2.1g2.1gNaHNaH22POPO441.4g1.4gKHKH22POPO4433、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：②②在此培养基中哪些作为碳源、氮源？在此培养基中哪些作为碳源、氮源？碳源：碳源：葡萄糖葡萄糖氮源：氮源：尿素尿素15.0g15.0g琼脂琼脂1.0g1.0g尿素尿素10.0g10.0g葡萄糖葡萄糖0.2g0.2gMgSOMgSO4`4`7H7H22OO2.1g2.1gNaHNaH22POPO441.4g1.4gKHKH22POPO4433、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数所需培养基：③③此培养基是否对微生物具有筛选作用？如果此培养基是否对微生物具有筛选作用？如果有，是如何进行筛选的？有，是如何进行筛选的？有有，此培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才，此培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。66、怎样证明此培养基具有选择性呢？、怎样证明此培养基具有选择性呢？以尿素为唯一氮源的培养基牛肉膏蛋白胨培养基是判断该培养基有选择性实验组对照组培养基类型是否接种结果只生长分解尿素细菌生长多种微生物是1.1.稀释涂布平板法（稀释涂布平板法（活菌计数法...
