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大肠菌群计数大肠菌群计数大肠菌群的定义大肠菌群的定义指一群在指一群在36℃36℃条件下培养条件下培养48h48h能发酵乳糖、能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。芽胞杆菌。该菌群主要来源于人畜粪便该菌群主要来源于人畜粪便,,作为粪便污作为粪便污染指标评价食品的卫生状况染指标评价食品的卫生状况,,推断食品中推断食品中肠道致病菌污染的可能。肠道致病菌污染的可能。大肠菌群不是细菌学上分类命名,而是一大肠菌群不是细菌学上分类命名,而是一组与粪便污染有关的细菌。这群细菌包括:组与粪便污染有关的细菌。这群细菌包括:大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷伯大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌。氏菌和阴沟肠杆菌。生化特征及血清学反应并非完全一致。生化特征及血清学反应并非完全一致。分布:分布:•广泛分布于自然环境。广泛分布于自然环境。•来源于人和温血动物的粪便。来源于人和温血动物的粪便。卫生学意义卫生学意义•大肠菌群作为粪便污染的指标菌评价样大肠菌群作为粪便污染的指标菌评价样品中是否受到粪便的污染。品中是否受到粪便的污染。•大肠菌群计数的高低,直接反映了样品大肠菌群计数的高低,直接反映了样品受粪便污染的程度。受粪便污染的程度。•表示对人体健康是否具有潜在的危险性。表示对人体健康是否具有潜在的危险性。大肠菌群是理想的粪便污染的指标菌大肠菌群是理想的粪便污染的指标菌•是人类和温血动物肠道菌群,在数量上是人类和温血动物肠道菌群,在数量上占优势。占优势。•随粪便排出体外后,在外界环境影响下,随粪便排出体外后,在外界环境影响下,其存活时间应与肠道致病菌大致相似或其存活时间应与肠道致病菌大致相似或稍长。稍长。•检验方法简便,易于检出与计数。检验方法简便,易于检出与计数。•对消毒剂的抵抗力应不低于肠道致病菌。对消毒剂的抵抗力应不低于肠道致病菌。主要修改内容主要修改内容将原标准拆分为将原标准拆分为大肠菌群、粪大肠菌群和大大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌计数三个独立的标准方法,标准名称肠杆菌计数三个独立的标准方法,标准名称变化。变化。大肠菌群的大肠菌群的MPNMPN法中乳糖胆盐等培养基改为法中乳糖胆盐等培养基改为月桂基硫酸盐胰蛋白眎月桂基硫酸盐胰蛋白眎(LST)(LST)肉汤为主的培肉汤为主的培养基;养基;增加了对样品匀液的增加了对样品匀液的pHpH范围要求;范围要求;增加了大肠菌群的平板计数法和纸片检测法;增加了大肠菌群的平板计数法和纸片检测法;MPNMPN法的结果报告由原“每法的结果报告由原“每100g100g((mLmL)大)大肠菌群的肠菌群的MPNMPN值”,修改为“每值”,修改为“每1g1g((mmLL)大肠菌群的)大肠菌群的MPNMPN值”;值”;大肠菌群计数大肠菌群计数第一法:第一法:MPNMPN法法第二法:平板计数法第二法:平板计数法第三法:第三法:PetrifilmPetrifilm测试片法测试片法第一法大肠菌群检验第一法大肠菌群检验MPNMPN法法原标准原标准乳糖胆盐发酵管乳糖胆盐发酵管EMBEMB琼脂琼脂乳糖发酵管乳糖发酵管培养基改变情况培养基改变情况新标准新标准第一法:第一法:月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤((LSTLST))煌绿乳糖胆盐肉汤(煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLBBGLB))第二法:第二法:结晶紫中性红胆盐琼脂结晶紫中性红胆盐琼脂(VRB(VRBA)A)煌绿乳糖胆盐肉汤(煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLBBGLB))操作步骤的改变操作步骤的改变原标准原标准初发酵初发酵EMBEMB分离培养分离培养染色,复发酵染色,复发酵报告报告现标准现标准LSTLST初发酵初发酵BGLBBGLB验证验证报告报告大肠菌群检验程图大肠菌群检验程图((新国标新国标MPNMPN法法))检样检样稀释稀释月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LSTLST))36±36±1℃,1℃,24~48±2h24~48±2h不产气不产气产气产气煌绿乳糖胆盐肉汤(煌绿乳糖胆盐肉汤(BGLBBGLB))36±36±1℃,1℃,24~48±224~48±2hh不产气不产气产气产气大肠菌群阴性大肠菌群阴性大肠菌群阳性大肠菌群...

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