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三、胚胎工程胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术,如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎,还需要移植到雌性动物体内生产后代,以满足人类大各种需求。1、概念操作对象:早期胚胎和配子(有性生殖细胞)技术手段:体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等理论基础:哺乳动物的受精卵和早期胚胎的发育规律2、早期胚胎发育受精卵:最初发育在输卵管进行有丝分裂。卵裂期:在透明带内进行有丝分裂,细胞数量不断增加,但胚胎总体积并不增加,或略有减少。桑椹胚:由具有全能性细胞构成,细胞数在32个左右,排列紧密。囊胚(内含囊胚腔):内细胞团:发育成胎儿各组织;滋养层细胞:发育成胎膜和胎盘原肠胚(内含原肠腔)内胚层:分化为消化道、呼吸道的上皮、肝脏、胰脏。外胚层:分化为表皮及其衍生物如指甲,毛、发等、感觉器官、神经组织。中胚层:分化为肌肉、结缔组织(包括骨路、血液等)生殖与排泄器官的大部分。3.胚胎干细胞概念:是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。胚胎干细胞来源:内细胞团细胞、原始性腺细胞干细胞的不对称分裂胚胎干细胞多能干细胞单能干细胞分化的体细胞1)形态:体积小,细胞核大,核仁明显.2)功能:具有发育的全能性,可分化为任何一种组织细胞.3)在体外培养的条件下,ES细胞可以增殖而不发生分化。对它可以进行冷冻保存,也可以进行遗传改造。特点:主要用途(1)治疗人类的某些顽症。例如,帕金森综合症、少年糖尿病和老年痴呆症等。利用ES细胞可以被诱导分化形成新的组织细胞,移植后可以使坏死或退化的部位得以修复。胚胎干细胞的应用前景(2)培育出人造组织器官,用于器官移植。通过ES细胞的诱导分化,可以培育人造组织器官,解决了供体器官不足和移植后免疫排斥的问题。(3)ES细胞也是研究体外细胞分化的理想材料,为揭示细胞分化和细胞凋亡的机理提供了有效手段。ES细胞在饲养层细胞上,或添加抑制因子的培养液中,可以维持不分化的状态。(4)用于对哺乳动物个体发生和发育规律的研究采集良种母牛的卵母细胞采集良种公牛精子卵母细胞的体外培养精子体外获能体外受精早期胚胎(胚胎移植)受体牛子代良种牛(超数排卵)(早期胚胎培养)(一)体外受精(二)胚胎移植保存剩余的卵子和精子的方法是什么?胚胎移植的生理学基础–同种动物发情排卵后,在一段时间内供体\受体具有相同的生理环境–早期胚胎一定时间内处于游离状态----便于收集–同种动物之间基本上不排斥----利于存活–供体胚胎与受体有正常的生理和组织上的联系,但遗传特性不受受体的影响----保留供体双亲的遗传特性.1.概念:用机械方法将早期胚胎切割成2等份,4等份或8等份等,经移植获得同卵双胎或多胎的技术。特点:后代具有相同的遗传物质.可看作是动物无性繁殖或克隆.(三)胚胎分割2、理论基础:动物胚胎细胞的全能性。所以胚胎分割的时期为桑椹胚或囊胚。12345胚胎分割移植的显微操作.牛胚胎的性别鉴定胚胎分割的其他应用操作注意事项:①对囊胚阶段的胚胎进行分割时,要将内细胞团均等分割。②胚胎分割的份数越多,操作的难度会越大,移植的成功率也越低。胚胎分割技术的缺陷:(1)刚出生动物的体重偏低,毛色和斑纹还存在差异;(2)采用胚胎分割技术产生同卵多胎的可能性是有限的。胚胎分割的意义:提高胚胎的利用率概念将雌性动物的早期胚胎或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的雌性动物内,使之继续发育成为新个体的技术。实质胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移,而胚胎本身的遗传物质并不发生改变,因此各种性状均能保持其原来的优良特性。可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能意义(1)对供、受体的选择和处理(供体牛选择遗传性能和生产性能优秀的个体,用促性腺激素进行超数排卵处理;而受体选择则重在健康的体质和正常的繁殖能力;用激素进行同期发情处理)↓(2)选择同种优秀的公牛进行配种或人工授精(多个受精卵);受精卵→卵裂→早期胚胎↓(3)胚胎收集(特制的冲卵装置从母体子宫中冲出胚胎)步骤↓(4)对胚胎质量检查(处于桑椹期或囊...

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