品保微生物检验员负责出具检测报告并作出符合性判定。品保科长负责微生物检测报告的审核。4.作业程序实验器材4.1.1实验器材、培养基和试剂1．超净工作台3.低温培养箱25-28°C5．电子/托盘天平（精确到0.1g）具的灭菌培养皿及移液管的干热灭菌洁净干燥的培养皿，倒放于专用培养皿铁筒内，洁净干燥的移液管，尖端朝下，平板计数琼脂培养基结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）、煌绿乳糖胆盐微生物检验规范1.目的明确微生物检验方法和监控标准，规范微生物检验的各项操作，通过对原料、产品及生产线各要求环节进行微生物测试，从检测结果来判定原料、产品及生产线微检监控点的微生物情况是否符合公司和国家规定的标准，确保产品品质。2.适用范围公司所有需要作微生物检验的原料、每批产品及微检监控点。3.职责品保微生物检验员负责微生物检验实验器材和无菌室的准备工作。品保微生物检验员负责原料和生产线微检监控点的微检样品抽样、保存、登记和微生物检测工作。成品制程人员负责成品微检样品的抽样工作，品保微生物检验员负责成品微检样品的保存、登记和微生物检测工作。7.烘箱9.记号笔11.镊子13.生物滤膜15.锥形瓶300ml/500ml+硅橡胶塞17.小发酵管19.接种环21.塑料篮子23.膜过滤设备培养基和试剂1.总菌数培养基2.大肠菌群培养基3.霉菌、酵母菌培养基4.氯化钠6.乙醇7.二氧化氯粉剂8.过氧乙酸微生物检验的前准备检验所需器4.2.1.12.恒温培养箱36±1C4.恒温水浴锅46±1C6.高压蒸汽杀菌锅8.酒精灯10.打火机12.药匙14.培养皿9cm/6cm16.试管18.试管架20.显微镜22.移液管1ml、5ml、10ml24.医用不锈钢剪刀测定项目培养基名称培养基里/1000ml蒸馏水杀菌条件菌落总数平板计数培养基121Cx15分钟大肠菌群结晶紫中性红胆盐琼脂煮沸灭菌2分钟大肠菌群煌绿乳糖胆盐40g121°Cx15分钟霉菌酵母虎红培养基35g121°Cx20分钟置于移液管专用的铁筒内，把铁筒放在烘箱中，于120°C干热灭菌120分钟后，调至160-180C干热灭菌120分钟后，关掉烘箱，自然冷却至60C以下，方可打开烘箱门取出置无菌室冷却备用。锥形瓶及移液管的湿热灭菌洁净的锥形瓶，塞上硅橡胶塞并用牛皮纸包扎好瓶口，洁净的移液管，用牛皮纸包扎完善后，置于蒸汽灭菌锅中，于121C湿热灭菌20分钟即可。镊子、接种环等的火焰灭菌接种环、镊子要在酒精灯上须灼烧过方可使用；稀释操作时试管口应在火焰上方；培养基容器口边在火焰上方。化学灭菌（75%酒精、100X10-6CI02）无菌超净台，手部及不能加热灭菌的PE或塑胶制品，桌子等需用化学灭菌法；操作台、桌子、凳子、地面在使用完后均用100x10-6CIO2擦洗灭菌。培养基及其缓冲稀释液的配制和湿热灭菌%生理盐水的配制称取2.25g氯化钠，溶于250ml蒸馏水中，经湿热灭菌即可。4.2.2.275%酒精的配制取375ml无水酒精，则需加水375/=125ml4.2.2.3培养基的配制和灭菌条件灭菌完全后的培养基置于46±1°C的水浴锅中,待培养基的温度降至46±1°C方可用.湿热灭菌的步骤：（1）检查蒸压釜中有否足够的水。（2）检查所有载有液体瓶子的螺旋盖（或塞）是否有松动。（3）检查各待灭菌物品是否已用牛皮纸包裹完善。（4）小心地关好杀菌釜的盖/门。除非每个锁都已彻底锁紧，否则不得加压。（5）检查排气道或排气阀是否打开。（6）加热，使所有空气从排气道中随着蒸汽自动排出。蒸汽要猛烈排放2-3min,以保证蒸压釜内冷空气全部排出。关闭通风阀或排气阀。（7）继续加热，至达到预定压力及温度。设备和培养基将在121C下维持20min,以进行灭菌。所需压力要连续维持一定时间。（8）所需加热时间一过，停止加热。在排气阀不打开的情况下让压力自动下降到零。否则不要打开蒸压釜。当压力为零时，小心打开排气阀，待蒸气排尽后，打开蒸压釜盖，让它敞开几分钟以泄去多余的热蒸汽，并将釜内原载有的物品充分冷却。（9）取出釜内原载有培养基或生理盐水的瓶子，将这些瓶子存放在无菌室的传递箱中待之冷却备用。灭菌完成后的培养基，温度降至46±1°C方可使用。所有灭菌完成后的物品，在使用前都必须保持包裹完善无破损的状态。4.2.3无菌室及超净台的灭菌4.2.3.1每天实验前、后把无菌室地面及超净台打扫干净，每天用100x10-6CIO2消毒...
