中国中医基础医学杂志14(总第574页)ChineseJournalofBasicMedicineinTraditionalChineseMedicine2004年8月第lO卷第8期2O0k4.V01.10.No.8【实验研究】固本活血壮骨颗粒对去卵巢大鼠骨质疏松症的影响李翠娟,张喜德,邢玉瑞,巩振东(1.北京中医药大学,北京100029;2.陕西中医学院,陕西成阳712083;3.山东省栖霞市中医院,山东栖霞265300)关键词:固本活血壮骨颗粒;骨质疏松症;骨密度;大鼠中图分类号:R285.5文献标识码:B文章编号:1006.3250(2004)08.0014.04骨质疏松症(Osteoporosis简称OP)是以骨量减少、骨的微观结构退化为特征的,致使骨的脆性增加以及易于发生骨折的一种全身性骨骼疾病⋯。本病为中老年人常见多发病,轻则腰酸背痛,四肢乏力,影响生活质量,重者并发骨折,增加病人的残疾率及死亡率。目前,对于本病的治疗尚无理想药物。固本活血壮骨颗粒是本课题组在临床观察、文献调研和理论研究的基础上,针对OP的病因病机,遵循补肾健脾活血之基本大法而确立的效方。经初步的临床观察和动物实验验证,疗效甚为满意。本文旨在运用现代医学的方法,通过动物实验研究固本活血壮骨颗粒对OP模型大鼠的影响,探讨其作用机制。l材料1.1动物3月龄雌性SD大鼠,体重21%±20g,购自陕西省中医药研究院实验动物中心,合格证编号:医动字第08.25号。1.2药品固本活血壮骨颗粒(由淫羊藿、杜仲、黄芪、三七等组成):由陕西省中药研究所提供,每1g含生药2.5g。大鼠给药量按文献方法折算,用蒸馏水将药物配成每毫升含生药0.39g(小剂量)、0.78g(中剂量)、1.56g(大剂量)混悬剂,置4℃冰箱中备用。尼尔雌醇片:北京四环制药二厂生产,用蒸馏水配成每毫升含尼尔雌醇0.1mg混悬液,备用。注射用青霉素钠:80万U/瓶,哈药集团制药总厂生产。1.3试剂及仪器钙、磷、碱性磷酸酶及肌酐试剂均为北京中生生物工程高科技术公司产品。尿羟脯氨酸试剂盒为南京建成生物工程研究所产品。血清雌二醇、骨钙素基金项目:陕西省教育厅立项课题(01JK089)试剂盒均由北京北免东雅生物技术研究所提供。主要实验器材有XD811生化分析仪,上海迅达医疗仪器公司生产;FT.613型自动计算125I放免测量仪,国营二六一厂生产;721.分光光度计,上海第三分析仪器厂生产;DPX.IQ型双能x线骨密度仪,Lunar公司生产。2方法2.1分组将54只大鼠称重后随机分为6组,每组9只:A组(空白对照组)、B组(模型对照组)、C组(固本活血壮骨颗粒小剂量组)、D组(固本活血壮骨颗粒中剂量组)、E组(固本活血壮骨颗粒大剂量组)、F组(尼尔雌醇对照组)。2.2造模除A组外,其余5组均以2%戊巴比妥钠2.5ml/kg,腹腔麻醉大鼠,全麻后,腹位固定大鼠,取最末肋骨下,腋中线和距脊柱外侧约2cm交叉处,剪去长毛,常规消毒,切开皮肤和背肌约1.0cm~1.5cm,切口视野可见一白色发亮的脂肪团,卵巢即包埋其中,以小镊子轻轻夹住脂肪团拉出切口处,分离脂肪团,即可见到粉红色的卵巢,先将卵巢下输卵管(包括脂肪团)用丝线结扎,再摘除卵巢,顺势将子宫送回腹腔,连续缝合腹腔层、肌层,间断缝合皮肤。术后给予青霉素20万U/次,肌注,Bid,连续3d,分笼隔离饲养7d后拆线。各组均在相同环境下自由饮水、摄食。术后1周,C、D、E组分别灌胃固本活血壮骨颗粒3.9g/kg、7.8g/kg、15.6g/kg,每日1次,F组灌胃尼尔雌醇混悬液1mg/kg,每周1次,给药体积均为1ml/lOOg,A、B组灌胃等体积蒸馏水。2.3取样维普资讯http://www.cqvip.com2004年8月第lO卷第8期2004.Vo1.10.No.8中国中医基础医学杂志ChineseJournal0fBasicMedicineinTraditionalChineseMedicine15(总第575页)连续给药10周,称重后停药取样,处死前收集大鼠24h空腹尿液,翌日,以摘除眼球法取血5ml,3000r/rain离心15rain分离血清,置抗凝管内,存于一20℃冰箱集中待测试。取大鼠双侧股骨,钝性分离附着的软组织以备用。2.4观测指标及方法(1)一般状况观察:观察大鼠摄食、活动、毛色情况,每日1次;称取大鼠体重,每周1次。(2)血生化指标:血清钙(S.Ca)、血清磷(S-P)均采用终点法;血清碱性磷酸酶(S.ALP)用动态法;血清骨钙素(S.BGP)、雌二醇(S.E,)用放射免疫法。...