口腔溃疡动物模型的制备及其评价VIP免费

口腔内细菌、病毒的感染,某些药物的应用及某些全身性疾病均可导致口腔溃疡的发生,尤其是复发性口腔溃疡(ROU)。由于ROU的病因及发病机制不明,而发病率又在逐年提高,临床且无特效药物治疗。因此积极寻找抗口腔溃疡的有效药物一直是国内外广大医药工作者所关注的话题,而口腔溃疡动物模型的制备对药物的研究就显得十分的重要。1口腔溃疡动物模型的制备与评价1.1免疫法诱导口腔溃疡动物模型将正常家兔急性处死,在无菌条件下取口腔粘膜组织,用内切式匀浆器匀浆,超声波震荡,低温离心,保留沉淀物,取上清液再行透析滤过小分子物质,将大分子蛋白留于袋内。反复透析5次,将袋内物冷冻干燥,获得粉末状蛋白,溶于磷酸缓冲液中,再加入完全弗氏佐剂成乳化液,注入家兔脊柱两侧皮内,共注射20点,每隔2周注射1次,共5次。家兔于第2次注射抗原后第8d口腔内均出现口腔溃疡〔1〕。该实验模型与人类ROU的发作极其相似,其机理可能是特异性蛋白作为抗原进入机体,产生了特异性抗体而引发口腔粘膜免疫反应。其观测指标除了溃疡出现的次数、溃疡愈合的平均时间外,还可以测定血清中抗口腔粘膜抗体滴度、外周血中淋巴细胞的亚型以及各种淋巴细胞的比例,同时检测TNF-a、IL-6、IL-8,以及组织病理学检查。该法造模的缺点是耗时长,方法较复杂,口腔溃疡出现的部位不固定,溃疡平均愈合面积的测量不容易掌握,不适合大规模动物实验。1.2化疗法建立口腔溃疡动物模型选用7周龄金黄地鼠,标准饮食,不限水,室内温度保持在(22±2)℃。腹腔注射60mg/kg5-FU两次,中间间隔1d。每次给予5-FU后并在乙醚麻醉的情况下用小钢丝刷将其左侧颊囊粘膜造成磨损面,大约在第3d时出现溃疡〔2〕。也可按一定浓度给予小鼠腹腔注射氨甲喋呤引起口腔溃疡〔3〕。该造模的观测指标有溃疡愈合的平均面积、平均时间,某些生化和免疫学指标以及组织病理学检查。该模型的表现与临床很接近,具有一定的代表性。但损伤比较大,在口腔溃疡的发生部位、发生时间、动物选择、药物种类、给药剂量及途径等方面还口腔溃疡动物模型的制备及其评价崔相一,彭芳,李玲(大理学院药学院,云南大理671000)[摘要]目的:探讨和评价口腔溃疡动物模型制备的方法。方法:综合分析国内外关于口腔溃疡动物模型制备的研究进展并加以归纳。结果:制备口腔溃疡动物模型的方法虽然较多,但存在某些局限性,有待于进一步的开发和完善。结论:口腔溃疡动物模型的建立对探讨口腔溃疡的病因及发病机制具有重要意义,同时也为抗口腔溃疡的新药研究提供理论依据。[关键词]口腔溃疡;动物模型;免疫[中图分类号]R781.5[文献标识码]B[文章编号]1672-2345(2007)10-0030-03[收稿日期]2007-06-15[作者简介]崔相一(1979-),男,吉林白城人,2005级硕士研究生,主要从事药理学研究.大理学院学报JOURNALOFDALIUNIVERSITY第6卷第10期2007年10月Vol.6No.10Oct.200730要进一步摸索。1.3化学烧灼法建立口腔溃疡动物模型方法一:取成熟健康家兔,用一内径0.6cm,长3cm的玻璃管垂直固定于家兔口腔粘膜表面,向管内注入体积分数为30%的冰醋酸0.2ml,30s后用棉签蘸出冰醋酸。24h后,测定粘膜溃疡面积和观察炎症充血情况〔4〕。方法二:取健康豚鼠,将小棉球置于直径为5mm的玻璃管一端(使之与关口平齐),再将玻璃管放在90%石炭酸溶液中,使药液浸透棉球,然后将玻璃管的棉球端置于豚鼠一侧粘膜上烧灼60s,24h后观察口腔溃疡的出现〔5〕。方法三:用0.025g/kg戊巴比妥钠麻醉大鼠,将NaOH晶体在双侧下唇靠口角粘膜处烧灼5～8s,生理盐水冲洗后形成溃疡〔6〕。方法四:用0.2mol/L的稀盐酸涂在豚鼠的口腔粘膜及舌面上,3次/d。一周后选择有4个以上(包括4个)溃疡面的豚鼠进行实验〔7〕。以上几种方法是利用酸、碱等化合物诱发口腔溃疡模型,观测的指标主要有溃疡大小、愈合时间、炎症细胞数等。该法操作简便易行,适合大规模动物实验,可作为某些促进口腔粘膜愈合的药物及抗炎的药物筛选模型,但该法不适合作为ROU的动物实验研究。1.4氧自由基法诱导口腔溃疡动物模型方法一:给乙醚麻醉后的Wistar大鼠双侧颊囊粘膜下注射10mmol/L甲基紫精(PQ)溶液,每侧注射1个部位,每个部位注射10μl,诱发口腔溃疡〔8〕。方法二:取金黄地鼠,乙醚麻醉,止血钳分开上下颌,固定后用...