专题1基因工程第一节基因工程的工具海南省屯昌县屯昌中学刘学如何得到蜘蛛羊?蜘蛛细胞绵羊细胞蜘蛛基因来源种类作用作用结果阅读课本4-5页“限制性核酸内切酶——分子手术刀”的相关内容,小组展示答案并纠正错误。自主学习1一、基因工程的工具-分子手术刀限制酶有4000多种。以下是几种常用的限制酶识别序列及切割位点。11:识别:识别回文序列回文序列限制性内切酶(EcoRⅠ)作用过程点击播放点击播放注:限制酶的作用部位磷酸二酯键SmaⅠSmaⅠ平末端平末端平末端平末端学生活动(一)在人胰岛素基因两侧各有EcoRI限制酶识别的序列GAATTC,切割位点在G和A之间,请小组合作提取人的胰岛素目的基因。剪刀:代表EcoRI限制酶Q1Q1:剪切下来的末端是平整的吗?:剪切下来的末端是平整的吗?Q2Q2:将剪切下来:将剪切下来44个末端两两放在一起,个末端两两放在一起,是否可以粘合?是否可以粘合?Q3:Q3:为什么上述的黏性末端两两放在一起,为什么上述的黏性末端两两放在一起,都能发生碱基互补配对呢?都能发生碱基互补配对呢?探究活动(一)载体的种类载体的必要条件载体的作用阅读课本第6页“分子运输车”——运载体的相关内容,小组展示答案并纠正错误。自主学习2二、基因工程的工具-分子运输车能复制并带着插入的目的基因一起复制有切割位点标记基因将来可用含青霉素的培养基鉴别。基因工程中常用的载体——质粒质粒是一种裸露的、结构简单独立于细菌拟核之外、具有自我复制能力的双链环状DNA分子。安全无毒,大小适中在天然质粒的基础上进行人工改造类型来源功能相同点差别E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶阅读课本第5页“分子缝合针”——DNA连接酶的相关内容,小组展示答案并纠正错误。自主学习3三、基因工程的工具-分子缝合针DNA连接酶的作用过程点击播放点击播放课后探究:课后探究:DNADNA连接酶与连接酶与DNADNA聚合酶是一回事吗聚合酶是一回事吗??学生活动(二)模拟DNA重组操作,完成人胰岛素基因与质粒重组,小组合作尝试重组所有可能出现的连接情况。白色纸条:运载体,环状彩色纸条:目的基因剪刀(代表EcoRI)透明胶带(代表DNA连接酶)QQ1.目的基因与质粒连接时可能出现几种情况?1.载体与目的基因之间的连接2.载体与目的基因的反向连接3.载体与载体的连接4.目的基因与目的基因的连接5.载体的自身环化6.目的基因的自身环化QQ2.如何避免出现上述情况?选择两种限制酶同时切割目的基因和质粒,避免自身环化。探究活动(二)16现实中的问题中国每10人就有一个糖尿病患者有效药物:胰岛素--从猪的胰脏中提取1位病人、1年需要3500头猪生物科学技术的发展1978年把人胰岛素基因导入大肠杆菌中,大肠杆菌合成人胰岛素10立方米的发酵罐培养生产一次,可供1位病人1年之需课后作业:如何让大肠杆菌产生人的胰岛素基因?预习第二节内容,写出基因工程的操作步骤。“分子手术刀”:限制性核酸内切酶“分子缝合针”:DNA连接酶“分子运输车”:载体来源作用结果分类作用载体种类载体的条件作用基因工程的基本工具课堂小结11)不属于质粒被选为基因运载体的理由是)不属于质粒被选为基因运载体的理由是AA、能复制、能复制()()BB、有多个限制酶切点、有多个限制酶切点CC、具有标记基因、具有标记基因DD、它是环状、它是环状DNADNADD练习练习谈谈这节课你有什么收获?