线粒体的超活染色与观察VIP专享VIP免费

实验五线粒体的超活染色与观察实验简介线粒体是机体能量代谢的重要细胞器。本实验以肝细胞、线粒体是机体能量代谢的重要细胞器。本实验以肝细胞、人口腔上皮细胞、洋葱鳞茎内表皮细胞三种材料为实验对人口腔上皮细胞、洋葱鳞茎内表皮细胞三种材料为实验对象，通过詹纳斯绿象，通过詹纳斯绿BB专一性地对线粒体进行超活染色，可专一性地对线粒体进行超活染色，可使线粒体内中的细胞色素氧化酶系呈蓝绿色反应，而线粒使线粒体内中的细胞色素氧化酶系呈蓝绿色反应，而线粒体周围的细胞质呈无色反应，由此作为线粒体的特异性特体周围的细胞质呈无色反应，由此作为线粒体的特异性特征。征。实验学时实验学时33个。个。一、实验目的观察动、植物活细胞内线粒体的形态、数量与分观察动、植物活细胞内线粒体的形态、数量与分布。布。学习一些细胞器的超活染色技术。学习一些细胞器的超活染色技术。二、实验原理活体染色是指对生活有机体的细胞或组织某些结构能着色活体染色是指对生活有机体的细胞或组织某些结构能着色但又不影响细胞的生命活动和产生任何物理化学变化以致但又不影响细胞的生命活动和产生任何物理化学变化以致引起细胞的死亡的一种染色方法。因此活染技术通常可用引起细胞的死亡的一种染色方法。因此活染技术通常可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。根据所用染色剂的性质和染色方法的不同，通常把活体染根据所用染色剂的性质和染色方法的不同，通常把活体染色分为体内活染与体外活染两类。体内活染是以胶体状的色分为体内活染与体外活染两类。体内活染是以胶体状的染料溶液注入动、植物体内，染料的胶粒固定、堆积在细染料溶液注入动、植物体内，染料的胶粒固定、堆积在细二、实验原理胞内某些特殊结构里，达到易于识别的目的。体外活染又称胞内某些特殊结构里，达到易于识别的目的。体外活染又称超活染色，它是由活的动、植物分离出部分细胞或组织小超活染色，它是由活的动、植物分离出部分细胞或组织小块，以染料溶液浸染，染料被选择固定在活细胞的某种结构块，以染料溶液浸染，染料被选择固定在活细胞的某种结构上而显色。上而显色。詹纳斯绿詹纳斯绿BB是毒性较小的碱性染料，可专一性地对线粒体进是毒性较小的碱性染料，可专一性地对线粒体进行超活染色，这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作行超活染色，这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使染料始终保持氧化状态用，使染料始终保持氧化状态((即有色状态即有色状态))，呈蓝绿色；而，呈蓝绿色；而线粒体周围的细胞质中，这些染料被还原为无色的色基线粒体周围的细胞质中，这些染料被还原为无色的色基((即无即无色状态色状态))。。三、实验用品11、材料、材料肝细胞、人口腔上皮细胞、洋葱鳞茎内表皮细胞肝细胞、人口腔上皮细胞、洋葱鳞茎内表皮细胞22、器材、器材显微镜、恒温水浴锅、解剖盘、剪刀、表面皿、显微镜、恒温水浴锅、解剖盘、剪刀、表面皿、吸管、牙签、吸水纸。吸管、牙签、吸水纸。33、试剂、试剂11．．RingerRinger溶液溶液氯化钠氯化钠0.85g0.85g氯化钾氯化钾0.25g0.25g氯化钙氯化钙0.03g0.03g蒸馏水蒸馏水100ml100ml2.1%2.1%詹纳斯绿詹纳斯绿BB溶液（原液）溶液（原液）称取称取50mg50mg詹纳斯绿詹纳斯绿BB溶于溶于5mlRinger5mlRinger，稍加微热，稍加微热(30(30～～4040℃℃))，使之溶解，用滤纸过滤后，即为，使之溶解，用滤纸过滤后，即为11％原液。％原液。3.3.詹纳斯绿詹纳斯绿BB溶液（应用液）溶液（应用液）取取11％原液％原液1ml1ml加入加入49mlRinger49mlRinger溶液溶液,,混匀即可。现用现混匀即可。现用现配。配。四、实验操作1.1.人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色观察人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色观察2.2.小白鼠肝细胞线粒体的超活染色观察小白鼠肝细胞线粒体的超活染色观察3.3.洋葱鳞茎表皮细胞线粒中的超活染色观察洋葱鳞茎表皮细胞线粒中的超活染色观察1.人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色观察(1)(1)取清洁载玻片放在取清洁载玻片放在3737℃℃恒温水浴锅的金属板上，滴恒温水浴锅的金属板...