第一节蛋白质的提取和分离[课标要求]尝试蛋白质的提取和分离[知识梳理]一．背景知识1．常用的蛋白质分离提纯技术有和等。其中技术最为快捷灵敏，简便易行。2．电泳现象：。3．电泳技术分离蛋白质的原理：。4．聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）：。二．实践案例——血清蛋白的提取和分离1．材料用具（略）2．活动程序（1）点样：新配制血清5μL，与质量浓度为0.4g/mL的蔗糖溶液及质量分数为的指示剂等体积混匀后，用加样器吸取5μL样品，小心加到电泳样品槽的胶面上。（2）．电泳：打开稳压稳流电泳仪的电源，将电流调节至mA，待样品进入分离胶后，改为mA,当溴酚蓝前沿距离硅胶框下缘时，将电流调回零。关闭电源。（3）．染色：取出凝胶，放入质量分数为的中，染色与同时进行，使染色液没过胶板，染色。（4）．脱色：用体积分数为的浸泡漂洗数次，每隔更换脱色液，直至底色脱净，背景清晰。（5）．烘干胶板：将已脱色的凝胶板放在保存液中浸泡然后将凝胶板放在两层透气玻璃纸中间，自然干燥即可获得血清蛋白的电泳谱带。3．结果分析（1）分析没有出现电泳谱带的原因（2）通过辨认电泳谱带可初步判断血清中蛋白质的种类三．探究活动1．牛奶中酪蛋白的提取和检测提取原理：当pH=时，酪蛋白的溶解度降低，并析出沉淀。用除去酪蛋白中的脂肪后，即得到纯的酪蛋白。检测原理：酪蛋白中的酪氨酸，能与起颜色反应，首先生成白色沉淀，加热后变成。2．卵清蛋白的分离用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分离（同上）四．意义1．胰岛素的提纯2．对细胞癌变做出诊断[复习指导]本节课复习以聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）为例，以电泳技术分离蛋白质的原理为基础，注重电泳技术的主要的步骤，明确点样、染色、脱色等在整个实验中的地位，明确各步骤所用试剂以及它们的作用。[典题解析]用心爱心专心下列叙述正确的是（）A．蛋白质中含有游离的氨基，是碱性电解质B．蛋白质中含有游离的羧基，是酸性电解质C．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动[解析]电泳技术分离蛋白质的原理：蛋白质中既含有游离的氨基，又含有羧基，属于两性电解质，并且蛋白质在一定pH条件下带有电荷，作为带电离子，蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相反的电极方向移动。[答案]D。用心爱心专心
