第3讲植物的组织培养技术考点一菊花的组织培养一、基础知识1、植物组织培养的理论基础:植物细胞的全能性,基本过程:脱分化、再分化
外植体———→愈伤组织———→试管苗———→完整植株2、愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞
二、影响植物组织培养的条件1、材料因素:植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响实验结果
如:菊花组织培养一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料
一般容易进行无性繁殖的植物,也容易进行组织培养,如:芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季等
2、常用的培养基是MS培养基
含大量元素、微量元素、有机物(如蔗糖等)3、植物激素的影响:主要是生长素和细胞分裂素
使用顺序不同使用顺序实验结果用量比例不同生长素/细胞分裂素比值发育方向先生长素,后细胞分裂素有利于分裂但不分化比值高时利于根分化,抑制芽形成先细胞分裂素,后生长素细胞既分裂也分化比值低时利于芽分化,抑制根形成同时使用分化频率提高比值适中促进愈伤组织生长4、其它条件:菊花组织培养,将pH在5
8左右,温度18~22℃,并且每日用日光灯照射12h
三、实验操作1、制备MS固体培养基:(一般使用4℃保存配制好的培养基母液来制备)(1)配制各种母液:按配方比例配制成的浓缩液,使用时根据母液的浓缩倍数加蒸馏水稀释
(2)配制培养基:(由于菊花茎段的组织培养比较容易,因此不必添加植物激素
)(3)灭菌方法:高压蒸汽灭菌
2、外植体的消毒:进行表面消毒时,既要考虑药剂的消毒效果,又要考虑植物的耐受能力
3、接种→培养→移栽和栽培:移栽试管苗之前,让在培养间生长几日,再清洗掉根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩生活一段时间,再栽培到土壤中
四、教材思考题及答案1、在选取菊花茎段时,为什么要选取生长旺盛的嫩枝
脱分化(去分化)再分化移栽答:因为生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导