欢迎共阅1.Fluo-3AM（钙离子荧光探针）原理Fluo-3AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-3AM的荧光非常弱，进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3，从而被滞留在细胞内，和细胞内游离的钙离子结合，结合钙离子后可以产生较强的荧光。生理意义细胞内钙离子增多是细胞损伤的结果，因此此探针能表征细胞损伤程度激发波长506nm发射波长526nm（绿色）备注推荐使用2.Mag-fura-2AM（钙离子荧光探针）原理Fura-2AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fura-2?AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fura-2，从而被滞留在细胞内。Fura-2可以和钙离子结合，结合钙离子后在330-350nm激发光下可以产生较强的荧光，而在380nm激发光下则会导致荧光减弱。这样就可以使用340nm和380nm这两个荧光的比值来检测细胞内的钙离子浓度，可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异，荧光探针的渗漏，细胞厚度差异等一些误差因素。生理意义细胞内钙离子增多是细胞损伤的结果，因此此探针能表征细胞损伤程度激发波长为340nm和380nm发射波长510nm（蓝色）备注仪器滤光片不适用3Fluo-4-AM（钙离子荧光探针）原理Fluo4是一种将Fluo3结构中的Cl替换成F的钙荧光探针。由于将Cl替换成了电子吸引力更强的F，它的最大激发波长会向短波长处偏离10nm左右。所以用氩激光器激发时，Fluo4的荧光强度比Fluo3强1倍。由于Fluo4与钙离子的亲和力和Fluo3近似，所以使用上和Fluo3也基本相同生理意义细胞内钙离子增多是细胞损伤的结果，因此此探针能表征细胞损伤程度激发波长494nm发射波长516nm（绿色）备注用激光器激发时荧光强度强，因此不推荐4.DCFH-DA（活性氧荧光探针）原理DCFH-DA本身没有荧光，可以自由穿过细胞膜，进入细胞内后，被细胞内的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透细胞膜，从而使探针很容易被装载到细胞内。细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。生理意义检测细胞内活性氧表征细胞损伤程度激发波长485nm发射波长520nm（绿色）备注推荐使用5.DHR123（活性氧荧光探针）欢迎共阅原理本身无荧光,在超氧化酶存在时可被过氧化氢(H2O2)氧化,转变成发射绿色荧光的罗丹明123(Rhodamine123),因此广泛应用于检测细胞内活性氧(ROS),如过氧化物,次氯酸和过氧亚硝基阴离子等。生理意义检测细胞内活性氧表征细胞损伤程度激发波长507nm发射波长529nm（绿色）备注氧化后成罗丹明123，荧光强度可能受到线粒体膜电位的影响6.RhodamineI23（线粒体膜电位荧光探针）原理细胞膜通透的阴离子绿色荧光染料,能够迅速被活线粒体摄取,而无细胞毒性。生理意义标记线粒体膜电位激发波长488nm发射波长515~575nm（绿色）生理意义检测线粒体膜电位备注正在使用7.Hoechst33342（DNA荧光探针）原理Hoechst33342是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，常用于细胞凋亡检测。Hoechst染料可透过细胞膜在聚AT序列的富集区域的小沟处与DNA结合并对DNA染色而发出强烈的蓝色荧光。生理意义标记双链DNA激发波长355nm发射波长465nm（蓝色）备注正在使用8.FDA原理FDA可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。生理意义反映细胞膜完整性和细胞活力激发波长495nm发射波长520nm（绿色）备注正在使用9.PI（DNA荧光探针）原理它不能透过完整的细胞膜，但能透过凋亡中晚期的细胞和死细胞的膜而将细胞核染红，与细胞核中的DNA结合的PI发出的荧光，与未结合的PI相比，强度会增强20-30倍。生理意义检测死细胞及凋亡晚期细胞激发波长530nm发射波长615nm（红色）备注尝试过，但效果不好10.EB（核酸荧光探针）原理EB，不能透过细胞完整的细胞膜。溴化乙锭含有一个可以嵌入DNA堆积碱基之间的一个三环平面基团。它与DNA的结合几乎没有碱基序列特异性。在高离子强度的饱和溶液中，大约每2.5个碱基插入一个溴化乙锭分子。当染料分子插入后，其平面基团与螺旋的轴线垂直并通过范德华力与上下碱基相互作用。这个基团的固定位置及其与碱基的密切接近，导致与DNA结合的染料呈现荧光，其荧光产率比游离溶液中染料有所增加。生理意义检测死细胞激发波长545nm发射波长605nm（红色）备注有强致癌性，不推荐11.DAPI（DNA荧光探针）欢迎共阅原理DAPI可以穿透细胞...
