Fluo-3AM(钙离子荧光探针)原理Fluo-3AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料
Fluo-3AM的荧光非常弱,进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3,从而被滞留在细胞内,和细胞内游离的钙离子结合,结合钙离子后可以产生较强的荧光
生理意义细胞内钙离子增多是细胞损伤的结果,因此此探针能表征细胞损伤程度激发波长506nm发射波长526nm(绿色)备注推荐使用2
Mag-fura-2AM(钙离子荧光探针)原理Fura-2AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料
Fura-2
AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fura-2,从而被滞留在细胞内
Fura-2可以和钙离子结合,结合钙离子后在330-350nm激发光下可以产生较强的荧光,而在380nm激发光下则会导致荧光减弱
这样就可以使用340nm和380nm这两个荧光的比值来检测细胞内的钙离子浓度,可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异,荧光探针的渗漏,细胞厚度差异等一些误差因素
生理意义细胞内钙离子增多是细胞损伤的结果,因此此探针能表征细胞损伤程度激发波长为340nm和380nm发射波长510nm(蓝色)备注仪器滤光片不适用3Fluo-4-AM(钙离子荧光探针)原理Fluo4是一种将Fluo3结构中的Cl替换成F的钙荧光探针
由于将Cl替换成了电子吸引力更强的F,它的最大激发波长会向短波长处偏离10nm左右
所以用氩激光器激发时,Fluo4的荧光强度比Fluo3强1倍
由于Fluo4与钙离子的亲和力和Fluo3近似,所以使用上和Fluo3也基本相同生理意义细胞内钙离子增多是细胞损伤的结果,因此此探针能表征细胞损伤程度激发波长494nm发射波长516nm(绿色)备注用激光器激发时荧光强度强,因此不推荐4
DCFH-DA(活性氧荧光探针)原理DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜,进入细胞内后,