血红蛋白测定课件pptVIP免费

血红蛋白测定测定方法：氰化高铁血红蛋白法由国际血液学标准化委员会（ICSH）推荐，并经WHO确认为血红蛋白测定的参考方法。主要优点：操作简单，结果稳定可靠，试剂容易保存，能测定除SHb以外的所有血红蛋白，并易于建立质控。1.原理除SHb外，Hb被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白，再与CN-结合，生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白HiCN，吸收峰为λ540nm毫摩尔消光系数为44L·mmol-1·cm-1。因此根据标本的吸光度，即可求得血红蛋白总量（不含SHb）。2.器材和试剂a.分光光度计、移液管、微量吸管、试管等b.血红蛋白转化液3.操作（1）直接定量测定a.取血20ul，加到5ml血红蛋白转化液中，混匀，静置5分钟。b.用分光光度计比色。波长540nm，以空白转化液调零，测定吸光度“A”。c.计算Hb（g/L）=A××251＝A×367.76445844×1000(2).HiCN标准液比色法测定a.标准曲线绘制和k值计算。以标准品血红蛋白含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。或求出换算常数K.K=血红蛋白含量之和/吸光度之和。b.标本的血红蛋白转化和比色同直接定量测定，得到标本的A.c.通过标准曲线查出待测样本的血红蛋白浓度或用k值来计算血红蛋白的浓度，即Hb(g/L)=K*A4.注意事项：a.KCN为剧毒药品，要小心对待，实验完后要用次氯酸钠溶液处理后才能弃倒。b.血红蛋白转化液不能贮存在塑料瓶中，否则CN-下降使结果偏低。6.正常参考值成年男性：120-160g/L成年女性：110-150g/L新生儿：170-200g/L70岁以上老年男性：94.2-122.2g/L70岁以上老年女性：86.5-111.8g/L红细胞计数和血红蛋白测定的临床意义红细胞与血红蛋白的增减不一定成比例，如大细胞性贫血患者的RBC往往较Hb减少显著；而小细胞性贫血患者则相反。一、红细胞和血红蛋白增高标准：成年男性RBC＞6.0×1012/L,Hb＞170g/L成年女性RBC＞5.5×1012/L,Hb＞160g/L1.相对增高因脱水血液浓缩所致。如严重腹泻、大面积烧伤等2.绝对增高组织缺氧骨髓幼红细胞有丝分裂RBCEpo刺激肾a.生理性升高高原生活和剧烈运动，新生儿b.病理性升高严重的慢性心肺疾病继发性红细胞增多症真性红细胞增多症为原发性红细胞增多症，属造血干细胞疾病长期组织缺氧二、红细胞和血红蛋白减低1.生理性贫血妊娠中晚期：血容量增加，血液稀释6个月至2岁：血容量增加速度大于RBC与Hb的生成有些老年人：摄取、利用营养和造血功能减退2.病理性贫血红细胞的丢失、破坏，造血原料不足，骨髓造血功能障碍等原因分级：轻度贫血：成年男性＜120g/L成年女性＜100g/L中度贫血：Hb＜90g/L重度贫血：Hb＜60g/L极度贫血：Hb＜30g/L谢谢