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十:探究培养液中酵母菌种群数量的变化①单细胞真核生物,异养生物,兼性厌氧型②既能进行出芽生殖又能进行有性生殖,在氧气充足的环境中主要以出芽生殖的方式快速增殖;在条件恶劣时,还能进行有性生殖。③良好实验材料:生长周期短,繁殖快,世代间不重叠。生长的最适宜温度在20℃-30℃之间,最简单的来源是使用食品类商店出售的用于发面或制酒的高活性干酵母作为菌种【酵母菌】①探究酵母菌的呼吸方式(有氧、无氧呼吸)实验②本实验③酵母细胞固定化④果酒果醋制备1、液体培养基(5%葡萄糖):高渗溶液中,酵母菌失水过多而死亡酵母菌,在含糖的液体培养基(培养液)中酵母菌繁殖很快,迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群,通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。一、实验原理3.计数方法:抽样检测法利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法,一般用于单细胞微生物数量的测定。2、限制因素:①温度(25~30℃)②氧气(先通气再密闭,先有氧增加酵母数量)③pH(下降)④养分⑤有害代谢废物(酒精)等是影响种群数量持续增长的限制因素。1、显微镜(1)区分活、死菌:①质壁分离②脂肪鉴定③有丝、减数分裂④本实验2、血球计数板(单细胞微生物计数法-红细胞)优点:①直观、快速;②液体培养基中菌体的计数;③显微镜下计数;④活菌体和死菌体的总和,又称为总菌计数法。二、使用器材台盼蓝、亚甲基蓝—被染上蓝色的(即死菌)—细胞膜的选择透过性(2)血球计数板(2个计数室)1个方格网—9个大方格—中间的为计数室1计数室=大方格=125个中方格=25×16=400个小方格16个中方格=16×25=400个小方格大方格中方格小方格方格网化放大后的方格网计数室IHGFEDCBA25×1616×25若是25×16的计数室,选5个中格(选4个角和中央的中格)若是16×25的计数室,选4个中格(选4个角的中格)1mm1mm计数室大小:长:1mm宽:1mm高:0.1mm体积:mm3mL10-40.1⑶使用方法①镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。若有污物,则需要清洗后才能进行计数。④显微镜计数:菌体沉降到底部,如果不沉淀会偏注:如果先加后盖:①空气中杂菌落入计数室②水分子张力偏大②稀释:将酵母菌培养液进行适当的稀释,如菌液浓度低,可不必稀释。③加样品(先震荡—使酵母菌分布均匀,使实验结果精确):①先盖上盖玻片②再加样液③自行渗入计数室。④用滤纸吸去小⑥清洗:先浸泡和后冲洗若一个小格内酵母菌过多,难以数清,应当采取怎样的措施?⑤镜检原则:25个中格,检5个中格16个中格,检4个中格小方格计数(5~10个为宜)计数原则:记上不记下,记左不计右(计相邻两边及其夹角)适当稀释(4)计算:先求计数室(1个大方格)的数量10-4mL=0.1mm3=×255个中方格数51mL总菌数=计数室×稀释倍数×104总菌数面积种群密度=三、实验设计1、探究性实验一般步骤有发现问题、提出假说、设计、实施实验、分析结果,得出结论、表达、交流及再探究。2、提出的问题是:培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?作出最合理的假设:培养液中酵母菌种群的数量先增加,在最大值稳定一段时间后再下降3、探究步骤:(1)配制500mL无菌质量分数5%的葡萄糖溶液;以及配制酵母菌菌种母液;(2)将5%的葡萄糖溶液加入到锥形瓶中,并将酵母菌菌种接种到培养液中;用血球计数板计数,估算出1mL培养液中酵母菌的初始数量(N0);次数12345678时间/h024487296120144168酵母菌数(个∕mL)ABC平均值(3)将试管放在适宜温度(约25℃)条件下培养,连续观察7天,每天定时取样并计数,分别记录下这7天的数值;设计实验数据记录表格(思考:每天每次只测一次行吗?)问题①该实验没有另外设置对照实验,原因是②该实验是否需要重复实验?,试解释原因。有对照,时间上形成前后自身对照。是多次测量取平均值,减少实验误差,为了提高实验数据的准确性第1天第4天第6天第7天死亡4、分析结果,得出结论⑴根据表格平均值作出培养液中酵母菌种群数量的变化曲线。如图:(示例)⑵在有限的环境条件下,一定时间内,培养液中酵母菌种群数量随时间呈__S__型增长变化。之后种群数量会下...

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