动物细胞培养130913VIP专享VIP免费

大面积皮肤烧伤或烫伤？1、概念：从动物机体中取出相关组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。（三）动物细胞培养3、过程：2、原理：细胞增殖（有丝分裂）Q2选什么组织？Q3.为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散成单个细胞？分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排出代谢废物；而用大块组织培养时，内部细胞的营养供应和代谢废物的排出都较困难。动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们的细胞分化程度低，增殖能力强，分裂旺盛，容易培养。Q4.如何分散细胞？弹性蛋白弹性蛋白胰蛋白酶胰蛋白酶消化酶最适pH胃蛋白酶1.5--2.5胰蛋白酶8胶原蛋白酶7体液7.2--7.4Q5胰蛋白酶会不会把细胞消化掉吗？胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。2.过程幼龄动物取动物器官和组织剪碎组织胰蛋白酶处理原代培养单个细胞Q6培养细胞应该模拟内环境的哪些方面呢?（1）全部的营养物质（2）适宜的温度和PH值（3）必要的气体条件（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）保证细胞顺利的生长增殖36.5+（-）0.5度,7.2-7.4O2和CO2（95%空气和5%CO2）维持培养液的PHCO2培养箱-模拟人体内环境•维持二氧化碳水平（5-10％）•湿度•温度（37℃）白色念珠菌感染（4）无菌、无毒（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）贴壁生长：大多数组织细胞不适应悬浮生长，必须在固定的表面生长和分裂。细胞在贴壁生长过程中,当细胞间相互接触时,细胞生长和分裂停止,最后形成单层细胞。接触抑制1.培养中的人正常B细胞能够无限地增殖。2.人的成熟红细胞经过培养能形成大量细胞。3.出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程属于原代培养。4.通常在细胞培养基中加入适量血清，其原因是补充合成培养基中缺少的营养物质。××××××√√辨析动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液细胞株细胞系细胞增殖无限传代去掉组织间蛋白动物细胞培养不能最终培养成生物体4、应用（1）大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）资料1：干扰素是动物细胞分泌产生的蛋白质，具有抗病毒等多种生物学活性。β干扰素是人的成纤维细胞产生的，一个成纤维细胞产生的β干扰素量非常低。现要获得大量的β干扰素。如何解决？信息2：2005年4月，美国一家非官方癌症研究中心发布信息说，“高露洁”牙膏中含有的抗菌化学物质三氯生可能是致癌物质。公众对此表示怀疑。如何检验该药物的毒性？（2）培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性①材料准备----液体试剂a.浓度为0.99%的“三氯生”试剂；b.细胞培养液：b细胞培养液：水、无机盐、、、、促生长因子、血清等，为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的。c..胰蛋白酶微量元素氨基酸葡萄糖抗生素③制备细胞培养液：取两个培养瓶，分别标号为1、2，⑥预期结果及结论：a.若1号和2号培养瓶中变异细胞的百分数相当，则说明.b.则说明.c．则说明.0.99%三氯生可能抑制人体细胞癌变加入等量培养液，1号培养瓶中的培养液加入0.99%三氯生，2号培养瓶中不加三氯生0.99%三氯生对人体有害0.99%三氯生对人体无害若1号培养瓶中变异细胞的百分数大于2号瓶若1号培养瓶中变异细胞的百分数小于2号瓶4、应用（3）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。50代以后失去接触抑制接触抑制动物细胞生长特性细胞株：从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞，能传到40-50代，其遗传物质没有发生变化。细胞系：传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了变化，带有癌变的特点，可能在培养条件下无限制的传代下去，这种传代细胞称为细胞系。动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液胰蛋白酶10代细胞原代培养50代细胞传代培养细胞株无限传代细胞系分散的细胞加培养液胰蛋白酶