植物细胞工程植物细胞工程常用技术手段常用技术手段一、一、植物组织培养技术植物组织培养技术二、植物体细胞杂交技术二、植物体细胞杂交技术专题专题22细胞工程知识结构体系细胞工程知识结构体系动物细胞工程动物细胞工程常用技术手段常用技术手段一、一、动物细胞培养动物细胞培养二、动物细胞核移植二、动物细胞核移植细细胞胞工工程程三、动物细胞融合三、动物细胞融合四、生产单克隆抗体四、生产单克隆抗体(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物体细胞杂交过程示意图1.什么是动物细胞融合？2.动物细胞融合的结果是什么？一.动物细胞融合一.动物细胞融合一、动物细胞融合（P52）1.含义：指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程2.结果：形成含有2或多个细胞遗传物质的单核杂交细胞4.融合原理：细胞膜的流动性5.诱导方式归纳：物理法：如离心、振动、电激化学法：如聚乙二醇（PEG)生物法：如灭活的病毒7.意义：突破有性杂交局限，使远缘杂交成为可能研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等3.别名：细胞杂交8.应用：特别是利用杂交瘤技术，制造单克隆抗体6.过程：植物体细胞杂交动物细胞融合理论基础相同细胞膜的________不同植物细胞的______性细胞的_______诱导手段相同物理法(离心振动电激等)化学法(_______)不同生物法(_________)处理方法不同用纤维素酶和_______去除细胞壁后，诱导原生质体融合用胰蛋白酶或_________处理使细胞分散后诱导细胞融合结果不同杂种细胞经组织培养后获得_________培养杂交细胞，生产_________相同改变_________，产生新性状全能增殖聚乙二醇PEG灭活的病毒果胶酶胶原蛋白酶细胞产品杂种植物遗传物质流动性处理方法诱导手段结果理论基础植物体细胞杂交与动物细胞融合异同课堂练习1.下列关于动物细胞融合的说法，不正确的是（）A.动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程B.动物细胞融合后形成的具有原有两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞称为杂交细胞C.常用的诱导动物细胞融合的因素有：聚乙二醇、灭活的病毒、电激、紫外线照射D.细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交称为可能C1、抗体的传统生产方法和步骤：抗原反复注射到动物内从动物的血清中分离抗体二、单克隆抗体二、单克隆抗体产量低，纯度低，特异性差2、该法制备抗体的缺（特）点：一个只分泌杂交瘤细胞动物细胞培养技术动物细胞融合技术单克隆抗体既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞米尔斯坦柯勒米尔斯坦柯勒3.我们所学的哪种细胞可在体外无限增殖？1.抗体是由何种细胞产生的？2.一个B淋巴细胞能产生几种抗体？B淋巴细胞骨髓瘤细胞能无限增殖一种特异性抗体B淋巴细胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞在具有筛选作用的培养基上培养专一抗体检验阳性克隆上述杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞单克隆抗体注射到小鼠体内体外培养单克隆抗体的制备过程单克隆抗体的制备过程①为什么要给小鼠注射特定的抗原蛋白？②B淋巴细胞与骨髓瘤细胞两两融合有哪几种方式？③杂交瘤细胞是如何筛选出来的？④如何才能培养出大量的单克隆抗体？合作与探讨BB瘤B瘤瘤（一选）用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞(瘤B)（二选）选出能产能产生特定抗体、培养生特定抗体、培养条件下能无限增殖条件下能无限增殖的的杂交瘤细胞杂交瘤细胞√体外培养体外培养小鼠小鼠腹腔内腹腔内培养培养获得产生相应抗体的B淋巴细胞(浆细胞）单克隆抗体B淋巴细胞浆细胞抗体抗原刺激分化形成合成分泌33）、为何要进行两次筛选？）、为何要进行两次筛选？4）、如何进行第2次筛选？克隆化培养和抗体检测。第1次筛选得到杂交瘤细胞（多种）。第2次筛选得到能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。问题强化：1）、本过程利用了哪些原理？免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理2）、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体2、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经...
