小分子半抗原设计VIP免费

小分子抗原现在做的最多的是农药和兽药，这方面的文献也很多。以前查过一些材料，个人觉得小分子抗原能否制备出高性能的单克隆抗体主要以下几点决定。对于半抗原结构的选择，如果待测物本身含有NH2，COOH，OH等活性基团，可以利用待测物活性基团加入间隔臂，然后联入载体蛋白就可以成功合成人工抗原，制备特异性良好的抗体(周思祥，刘福成，2005)。但大部分待测物上并不含有活性基团或活性基团对药物的特异性和极性影响很大，所以大部分用于人工抗原合成的半抗原要经过改造或从头合成。例如在关于有机磷农药倍硫磷的免疫检测方法的研究中，半抗原物的获得采用的合成方法并不是从倍硫磷开始合成，而是采用另一途径，从起始物重新合成，这样反而能取得较好的效果，这一点对于制备具有多残留检测能力的抗体来说更为重要，只需合成出几种待测药物共有的结构就有可能制备出具有多残留检测能力的抗体。(YooJungKima,2003)待测物本身的结构有时对建立方法的性能有很重要的影响，在分子量在111－1202Da的化合物制备的单克隆抗体的亲和系数的试验中,半抗原的分子量在334374Da之间时，制备的单克隆抗体具有很高的亲和系数。但当要检测的小分子化合物的分子量小于300Da时，产生具有良好灵敏度和特异性单克隆抗体的可能性下降(Chappeyetal.，1994)。这说明药物的分子量是影响抗体性能的重要因素。同时待测物的结构对于制备人工抗原的难易程度有重要影响，有些半抗原经过理论分析能制备出高质量的抗体，但从化学合成的角度，这些化合物可能是合成不出来的或工艺过于复杂，所以半抗原结构能否合成出来，也是半抗原结构设计过程中要考虑的问题。如果待测物结构过于简单，可能也是不能建立免疫检测方法的。待测物的结构最好含有特征性的环状结构或侧链结构，甚至含有杂原子，都能够增加制备出高质量抗体的可能性。在对脂肪酸类物质制备抗体的试验中，对于脂肪酸类物质来说，如果含有两个以上的羰基，及与蛋白偶联之后还有多余的羰基增强亲水性，同时酰基的不饱和双键和极性的头部结构都可以做为B细胞的抗原决定簇，可以将其他抗原性很弱的部分变成强抗原性。再者如果脂肪酸含有平面结构，也可以作为抗原决定表位，使产生特异性的抗体。这说明小分子的极性以及不饱和键，苯环结构都可以增强抗原性，简单的直链结构很难产生特异性很强的抗体，这也是一般选用直链作为间隔臂的原因。直链碳链本身的抗原决定性很差，不会产生针对间隔臂的抗体。合成人工抗原的过程中，即使半抗原绝大部分的官能团与待测物都是一致的，它也可能在联入蛋白载体的过程中受到屏蔽作用。小分子药物在与载体蛋白连接的部位很容易受到屏蔽。从而产生的抗体就会丧失对那些屏蔽基团的特异性。确定半抗原不受蛋白的屏蔽作用在人工抗原合成中非常重要，解决这一问题的最佳方法就是联入间隔臂。间隔臂的连接位点的选择对于抗体质量至关重要，最好不要影响小分子化合物中特征性的基团暴露于免疫B细胞的抗原表位，这也是待测物本身的羧基，氨基一般不能直接联入间隔臂，因为这些基团对小分子药物的电性和极性影响非常大。而且引入的间隔臂不能影响主要基团的电子分布，例如苯环和其他杂环类的电子分布，这就要求间隔臂的极性和能量要低，将对小分子药物的电子排布和空间结构的影响降到最低，从这个角度来说，低能量的直链间隔臂是最佳的选择。联入间隔臂的半抗原的电子分布与目标待测物的电子特性一致性对抗体针对待测物的特异性至关重要。半抗原间隔臂的连接位点，最好选择极性较低且远离半抗原的特征性结构。如果待测物的极性较高，半抗原合成的过程中最好保持其与目标待测物极性的一致性。人工抗原具有较高的极性，对于引发免疫反应有重要作用。在结构如图3Bentazon的抗体制备过程中，有三个介入位点。异丙基远离杂环，是联入间隔臂的理想位点，可以最小程度的改变待测物的物理和化学特性。但异丙基是这物质的特异性基团，对于保证制备抗体的特异性很重要，所以不能选择这个位点。BentasonII位的亚氨基具有很强的极性，如果间隔臂联入这个位点极性将会消失。这种化合物的衍生物大多为非极性，如果要制备多残留的抗体，增加交叉反应...