动物细胞工程 [知识结构] (一)动物细胞培养 1.过程: 思考: 1、细胞株和细胞系的区别? (细胞株的遗传物质与原细胞相比并没有发生改变,而细胞系的遗传物质发生改变,并带有癌变的特点) 2、动物细胞培养液的成分和性质? (水、无机盐、葡萄糖、氨基酸、维生素和动物血清,属于液体培养基) 2、动物细胞培养技术的应用: ①生产一些蛋白质生物制品——病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体; ②检测有毒物质; ③烧伤病人的植皮。 思考: 请设计实验,通过细胞培养技术检测某一河流是否受污染以及污染的程度? (提示:可以将实验分为两大组,一组用蒸馏水配置动物细胞培养液(对照组),一组用河水配置动物细胞培养液(实验组),分别用这两种培养液培养小鼠细胞,过一段时间后,通过显微镜观察两组培养液中细胞的形态,计算畸形率,如果两组培养液中细胞的畸形率大体相等,则说明河水没有被污染,如果实验组的畸形率高于对照组,可以判断河水被污染,可以根据畸形率的大小判断污染程度,畸形率越大,污染越严重) (二)动物细胞融合 灭活病毒的作用:凝集蛋白质,使膜分子重新排布。 填表比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的异同: 原 理方法步骤诱导方法结 果用途或意义植物体细胞杂交细胞膜流动性和植物细胞全能性酶解法去壁后诱导原生质体融合,形成杂种体细胞再经过组织培养形成杂种植株物理方法化学方法诱导成杂种植物植株克服远缘杂交不亲和的障碍,培育优良性状的杂种植株动物细胞融合细胞膜流动性分散成单个细胞后诱导细胞融合物理、化学、生物方法形成杂种细胞培育杂种细胞或大量获得细胞产品 (三)单克隆抗体的制备 1、克隆的概念 “克隆”从英文“clone”音译而来,其定义是无性繁殖系,在生物学领域有 3 个不同层次的含义。现在引申出的概念:遗传背景完全相同的一个群体。 1)DNA 水平,特定 DNA 片段通过重组 DNA 技术插入到一个载体(如质粒和病毒等)中,然后在宿主细胞中进行自我复制所得到的大量完全相同的该 DNA 片段的“群体”。 2)在细胞水平,克隆是指由一个单一的共同祖先细胞分裂所形成的一个细胞群体。比如:使一个单一细胞在体外的培养液中分裂若干代所形成的一个遗传背景完全相同的细胞集体即为一个细胞克隆。又如,在脊椎动物体内,当有外源物(如细菌或病毒)侵入时,会通过免疫反应产生特异的识别抗体。产生某一特定抗体的所有浆细胞都是由同一个 B 细胞分裂而成,这样一个浆细胞...