酵母双杂交操作步骤(中文翻译)VIP免费

（腺嘌吟）（亮氨酸）（色氨酸）（组氨酸）“四缺”）酵母氮源（）：葡萄糖即（购买来就配好的）(?（酵母菌储存在-70°C 中，引物和质粒 DNA 储存在-20°C 中）概念：1. 次序转化:指的是先将一种质粒转化进酵母中（常是 DNA-BD/baitplasmid）,在选择培养基中选择出阳性克隆，之后再将另外一个质粒（ADfusionlibrary）转化进去。优点：就是比共转化使用更少的质粒 DNA，也就是节约质粒 DNA。2. 共同转化：将两种质粒一起转化进酵母中。优点：比次序转化更容易操作。pGBKT7-…的选择物是：kanamycin（卡那霉素）？pGADT7 的选择物是：ampicillin（氨苄西林）？各种培养基:酵母氮源（）：（购买来就配好的）葡萄糖即（?“二缺”酵母氮源（）：（购买来就配好的）葡萄糖即酵母氮源（）：（购买来就配好的）葡萄糖即酵母氮源（）：（购买来就配好的）葡萄糖即注意：有两种，一种含有硫酸胺，另外一种不含硫酸胺。我们这用的是含硫酸铵的。（买来就加进去了的）。如果不含硫酸铵，那么要在终浓度的中再加入的硫酸铵,即最终在溶液中加入总量为的与硫酸铵。实际配制的方法是：配制的葡萄糖贮存液（贮存在°C）,过滤除菌，待高压灭菌的溶液温度降至°C以下时，再将葡萄糖贮存液加入。（过滤即可使用）酵母氮源，加在水中溶解，调至（大约加即可），之后补水至。高压完后待温度降至 C 以下，加入葡萄糖。培养基蛋白胨酵母提取物琼脂（只有制作平板才用）葡萄糖即培养基蛋白胨酵母提取物腺嘌吟（即终浓度为 0.003%）腺嘌吟可以耐受高温葡萄糖即实际配制的方法是：配制的葡萄糖贮存液（贮存在 C），过滤除菌，待高压灭菌的溶液温度降至°C以下时，再将葡萄糖贮存液加入。（李博士经验这一步不高压，过滤即可使用）配制的腺嘌吟溶液，过滤除菌，待高压灭菌的溶液温度降至 C 以下时，再将腺嘌吟溶液加入。（或将腺嘌吟直接加进去，为了方便我将直接加进去一起高压）（蛋白胨；酵母提取物；水大约）混合后，调至至，加水至，C 高压。注意：♦高压的温度和时间不能太长与太高，C 高压即可。♦可以在中加入的琼脂，以配成平板。♦需要加时，终浓度是-。（可以 C 贮存一个月，加入到平板中去可以 C 贮存一个月。）溶液（即配即用）用下列贮存液来配制:用灭菌水配，如需要可以加热至 C 以助溶。:用灭菌水配，如需要可以加热至°C 以助溶。:用灭菌水配，如需要可以加热至€以助溶。最后配成溶液是：（以为例）终浓度为配制需要加入的物质无菌...