复习-DNA重组技术的基本工具VIP免费

基因工程1.1 基因工程的基本工具1.2 基因工程的基本操作程序1.3 基因工程的应用1.4 蛋白质工程的崛起专题知识框架基因工程概念基本工具操作程序受体目的基因基因有关的工具（各种酶）比较基因载体基因剪刀基本针线应用及意义导入受体细胞蛋白质工程获取目的基因基因表达载体的构建一、什么是基因工程？1. 供体：提供 __________2. 操作环境： ______3. 操作水平： __________4. 原理： __________5. 受体：表达目的基因6. 本质：性状在 ______ 体内表达7. 优点：克服 _______________ 障碍，定向改造生物 _____目的基因体处分子水平基因重组受体远缘杂交不亲和性状二、需要哪些基本工具？1. 限制性核酸内切酶（简称：限制酶）（ 1 ）来源：主要从 ______ 生物中分离纯化出来。（ 2 ）作用：识别特定的 ___________ 并切开相应两个核苷酸之 间的 _____________ 。（ 3 ）结果：产生 __________ 或平末端。原核核苷酸序列磷酸二酯键黏性末端2. 载体（ 1 ）种类： _____ 、 λ 噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 能 __________ 有一个至多个 ________________ 有特殊的 __________【点拨】提取目的基因和切割载体使用同一种限制酶，目的是能形成相同的黏性末端，形成重组 DNA 分子。 质粒自我复制限制酶切割位点标记基因（ 2 ）质粒特点2. 作为载体的条件条件适应性稳定并能复制目的基因稳定存在且数量可扩大有一个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因具有特殊的标记基因便于重组 DNA 的鉴定和选择3.DNA 连接酶（ 1 ）种类：按来源可分为 E·coliDNA 连接酶和 T4DNA 连接酶。（ 2 ）作用：在两个核苷酸之间形成 ____________ 以连接 _____ _________ 。磷酸二酯键两段DNA 片段 基因工程的工具1. 与 DNA 相关的酶 （ 1 ）五种 DNA 相关酶的比较：作用底物作用部位形成产物限制酶DNA 连接酶DNA 聚合酶DNA 解旋酶DNA( 水解 ) 酶DNA 分子磷酸二酯键黏性末端或平末端DNA 片段磷酸二酯键重组 DNA 分子脱氧核苷酸磷酸二酯键子代 DNADNA 分子DNA 分子碱基对间的氢键磷酸二酯键形成脱氧核苷酸单链游离的脱氧核苷酸（ 2 ）限制酶和 DNA 连接酶之间的关系图示：【高考警示钟】 1. 切割质粒需使用限制酶 1 次，切割目的基因则需要使用相同的限制酶 2 次。因为质粒是环状 DNA ，而目的基因在 DNA 分子链上。 2. 质粒 DNA 分子上限制酶切...