军事医学科学院(博士)微生物 2002 年微生物1、毒力岛:毒力岛具有以下特点:1
编码细菌毒力基因簇的一个相对分子质量较大的(20~100kb 左右)染色体 DNA 片段;2
一些毒力岛的两侧具有重复序列和插入元件, 但是也可以没有;3
毒力岛往往位于细菌染色体的 tRNA 基因位点内或附近, 或者位于与噬菌体整合有关的位点,肠致病性大肠杆菌(EPEC)的 LEE 毒力岛就位于 tRNA selC 位点;4
毒力岛 DNA 片段的 G+C mol % 、密码使用和宿主细菌染色体有明显差异, 有的比宿主细胞的G+C mol% 明显高, 有的 明显低; 5
毒力岛编码的基因产物许多是分泌性蛋白和细胞表面蛋白, 如溶血素、菌毛和血红素结合因子, 一些毒力岛编码细菌的分泌系统(如Ⅲ型分泌系统)、信息传导系统和调节系统; 6
一种病原菌可以有一个或几个毒力岛; 7
一部分学者认为, 细菌的毒力岛应该包括位于噬菌体和质粒上的、与细菌的毒力有关的、其G+C 百分比和密码使用与宿主细胞明显不同的 DNA 片段;8
毒力岛可能与新发现的病原性细菌有关
2、定点诱变技术:是在体外特异性地取代、插入或缺失 DNA 序列中任何一个特定碱基的技术,包括盒式取代诱变、寡核苷酸引物诱变及 PCR 定点诱变等
3、DNA 微点阵芯片:寡核苷酸芯片的主要原理与 cDNA 芯片类似,主要通过碱基互补配对原则进行杂交,来检测对应片段是否存在、存在量的多少
它与 cDNA 芯片的本质差别在于寡聚核苷酸芯片固定的探针为特定的 DNA 寡聚核苷酸片段(探针),而后者为cDNA
基因表达芯片的两个重要参数是检测的灵敏度和特异性
cDNA 芯片由于基因长短不同以至 Tm 值各异,众多的基因在同一张芯片上杂交,使得杂交条件很难同一,使得传统的 cDNA 芯片的分辨能力受到限制
寡聚核苷酸芯片序列选择经过优化,利用合