基因工程技术生产凝乳酶的过程①②⑤③凝乳酶基因④限制酶切割位点质粒重组质粒39.(15 分)家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药。(1)进行转基因操作前,需用___________酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。(2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自 cDNA 文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间;若要检测干扰素基因在家蚕细胞中是否表达,可以采用的方法有 、 。(3)通过 PCR 技术可大量获取目的基因。PCR 反应体系主要包括:扩增缓冲液(含 Mg2+)、水,4 种脱氧核糖苷酸、模板 DNA、_____________和_________________。(4)培养家蚕细胞时,贴壁生长的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以_________________,增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。答案:39. (1)胰蛋白酶(或胶原蛋白酶) (2)启动子; 终止子; 分子杂交技术; 抗原-抗体杂交技术(符合题意即可) (1 分)(3)TaqDNA 聚合酶(热稳定 DNA 聚合酶); 与干扰素基因特异性配对的 DNA 引物 (4)增大细胞贴壁生长的附着面积 40.凝乳酶能凝固牛奶成奶酪,传统上凝乳酶只能从小牛的胃中提取,价格昂贵。1990 年,美国辉瑞公司生产出了食品产业所需的第一个基因工程产品 CHY—MAX 牌凝乳酶,其化学组成与从小牛体内提取的完全相同,但其更加物美价廉。生产过程如下图,据图回答问题:(1)过程②中从小牛体内提取的凝乳酶基因通常需要通过 技术进行扩增,该技术的原理是 。(2)基因工程的操作程序主要包括四个步骤,其核心是图中过程 (填序号),在该过程中重要使用的工具酶是 。 (3)过程④中理想的受体细胞是大肠杆菌,该类生物具有的特点是 ,要想把重组质粒导入大肠杆菌,首先必须用 处理大肠杆菌,使其转化为 细胞,然后将重组质粒和大肠杆菌在1缓冲液中混合培养完成转化过程。 (4)过程⑤将小牛凝乳酶基因转入大肠杆菌后,能够准确表达的主要原因是 九、降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科研机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,将能人工合成降钙素的DNA 与 大 肠 杆 菌的 DNA 分子进行重组,并成功地在大肠杆菌中得以表达。57.图 1 示人工合成降钙素 DNA 的过程。从预期新型降钙素的...