单克隆抗体在人体内的应用HGPRT-HAT培养基单克隆抗体在人体内的应用单克隆抗体在人体内的应用鼠源性单抗应用于人体时具有较强的免疫原性,将诱发产生人抗鼠抗体(humananti-mouseantibody,HAMA)反应;鼠源性单抗通常不能有效地激活人体的免疫反应,如补体依赖的细胞毒(CDC)作用及抗体依赖的细胞毒(ADCC)作用
单克隆抗体在人体内的应用解决上述问题的主要途径便是使鼠源性单抗人源化或研制完全的人源性抗体鼠源单抗人源化(嵌合抗体,改型抗体,镶面抗体)、抗体库技术及转基因小鼠技术成为人源化和人源性抗体制备的三大主要技术,在治疗性抗体的研制中起到关键作用单克隆抗体在人体内的应用鼠源单抗人源化鼠源单抗人源化经历了如下历程:恒定区人源化可变区人源化利用抗体库技术获得完全人源序列单克隆抗体在人体内的应用鼠源单抗人源化1
恒定区人源化——鼠/人嵌合抗体(chimericantibody)由于异源性McAb的免疫反应约有90%是针对恒定区(C区),要降低McAb的抗原性,必须对它的恒定区进行人源化
其原理是从分泌某McAb的杂交瘤细胞基因组中分离和鉴别出重组的功能性可变区(V区)基因,经基因重组与Ig恒定区基因相拼接,插入到适宜的表达载体中,构成鼠/人嵌合的轻重链基因表达质粒,经转染骨髓瘤细胞,通过筛选即可制备出鼠/人嵌合抗体
单克隆抗体在人体内的应用鼠源单抗人源化2
可变区人源化——CDR移植Ab(CDRgraftingantibody)由于鼠/人嵌合抗体保留了鼠可变区,仍引起HAMA,因此有必要将可变区也人源化
其原理是将鼠源McAb的6个互补决定区的氨基酸序列插入到人Ig的框架区,通常称为CDR移植
CDR移植技术的理论依据限于篇幅,在此省略…单克隆抗体在人体内的应用鼠源单抗人源化2
可变区人源化——CDR移植Ab(CDRgraftingantib