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实验名称:HE 染色颁发部门:实验研究部页数:1/2制定人审核人质量审核 批准人修订日期2013 年 11 月15 日宁淑芳韦文娥王琪张力图生效日期2013 年 11 月15 日2013 年 11月6 日2013 年 11月8 日2013 年 11月13 日2013 年 11 月13 日修订版次 第 1 版一 基本介绍苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining),简称 HE 染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。苏木精染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。HE 染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。二 实验试剂1 二甲苯2 无水乙醇及各级浓度的酒精溶液3 苏木素4 盐酸酒精5 伊红三 实验流程1 从烘箱中取出烤干的切片,投入二甲苯 I 中 10 分钟2 移入二甲苯 11,111 中各 10 分钟;3 移入无水乙醇 I,II,各浓度梯度的酒精溶液(95%,85%,70%,60%)各 5 分钟;3 移入蒸馏水中 10 分钟4 苏木素浸泡 8 分钟5 流水冲洗数分钟6 快速过盐酸酒精 3-5 秒7 流水洗 3 秒8 移入伊红液中浸染 15 秒9 流水洗 3 分钟10 晾干后中性树胶封片四 染色结果细胞核蓝色,胞质、肌纤维、胶原纤维呈深浅不一的红色实验名称:免疫组化颁发部门:实验研究部页数:1/3制定人审核人质量审核 批准人修订日期2013 年 11 月15 日宁淑芳韦文娥王琪张力图生效日期2013 年 11 月15 日2013 年 11月6 日2013 年 11月8 日2013 年 11月13 日2013 年 11 月13 日修订版次 第 1 版一 基本介绍免疫组化,是应用免疫学基本原理—抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。二 实验试剂与仪器1.仪器1)18cm 不锈钢咼压锅2)水浴锅2.试剂1)PBS 缓冲液(Ph7.2-7.4):NaCl137mmol/L,KCl2.7mmol/L,Na2HP044.3mmol/L,KH2PO41.4mmol/L。2)酶消化液:用 0.1N 的 HCl 配制。3)封片剂:中性树胶4)二甲苯,酒精5)3%H2O2三 实验流程1. 玻片处理:多聚赖氨酸 1:50 稀释后涂片,晾干备用;2.石蜡连续切片,切片厚 4um,60°C 烤片 2 小时;3. 脱蜡和水化3.1)将组织片置于二甲苯中浸泡 10 分钟,再更换二甲苯后再浸泡 10 分钟,再更换二甲苯后再浸泡 10 分钟...

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