寄生虫及寄生虫病研究新技术,方法VIP免费

1 第四章寄生虫及寄生虫病研究新技术、方法当今科学技术快速发展，多种学科和新兴领域相继涌现，不断产生新的交汇点和生长点， 从中引发出重大科学问题， 逐渐形成了现代医学的前沿领域， 这些领域的研究成果已成为寄生虫学发展的重要推动力。将医学前沿研究与寄生虫病防治实践相结合，始终是寄生虫学工作者关注和工作的重点。本章节简要介绍分子生物学和免疫学的一些前沿领域研究的新技术和新方法 , 为寄生虫病研究提供新思路。一、分子生物学1．基因组学和后基因组学的研究人类基因组研究计划（Human Genomic Project , HGP）于 1990 年正式开始实施，主要科学目标是研究基因组的结构，绘制遗传连锁图、物理图、序列图和转录图。近年来寄生虫基因组的研究已经开始，其中疟原虫和溶组织阿米巴基因组计划已宣布全部完成。血吸虫，包虫等还在进行中。主要内容有新基因的发现，物理图谱的制作，cDNA微型矩阵的制作，线粒体基因的测序以及生物信息学的研究等。应用于血吸虫基因组计划研究采用的主要技术有荧光原位杂交（FISH），表达序列标签（EST）， DNA 芯片微阵技术（chip microarray）。随着基因组计划的即将完成，目前已开始进入“后基因组学”时代，即识别和鉴定基因组的功能信息。后基因组学研究内容主要有：基因的识别和鉴定以及基因功能信息的提取和鉴定。目前识别基因的生物学手段主要基于以下原理和思路：①根据已知基因序列资料。②根据可表达序列标签（EST）。③对染色体特异性cosmid 进行直接的cDNA选择。④根据 CpG岛。⑤差异显示及相关原理。⑥外显子捕获及相关原理。⑦DNA微芯片技术。该技术可用于任何位点基因突变、缺失和插入等的鉴定，感染性疾病和肿瘤的检测，易患倾向基因的检测，新基因的发现，基因作图和基因表达研究等方向。DNA芯片技术在蚊虫抗性基2 因和疟原虫耐药基因的研究等项目中已经应用。⑧基因组扫描。⑨突变检测体系。基因功能信息的提取可采取下列方法：①绘制基因图，包括所有的基因及等位基因，系统鉴定基因突变体。②绘制基因表达谱，采用微点阵技术（microarray）、定量PCR、原位杂交及计算机参与，用于定量分析基因表达水平。③基因敲除（gene knock out）或转基因动物的建立，用以检测模式生物的生物学功能改变，这是了解特定基因功能的重要途径之一。④探测蛋白质水平、修饰状态和相互作用。采用双向凝胶电泳和质谱法相结合，并通过蛋白质数据库比较的方法识别蛋白质片段，检测磷酸...