细胞培养应注意的问题VIP专享VIP免费

. ; 1 冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后， 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。 2 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除 DMSO？ 除少数特别注明对 DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有 10-15ml 新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除 DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 3 可否使用与原先培养条件不同之培养基？ 不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。 4 可否使用与原先培养条件不同之血清种类？ 不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源 ， 所 以血清的种类和品 质 对于 细胞的生长会产 生极大的影 响 。来自 不同物 种的血清， 在一些 物 质 或分子 的量 或内容 物 上都有所 不同，血清使用错 误 常 会 造成细胞无法存活。 5 何谓 FBS, FCS, CS, HS ? FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相 同的意思 ， 两 者 都是指 胎 牛 血清， FCS 乃 错 误 的使用字 眼 ， 请 不要再使用。CS (calf serum) 则是指 小 牛 血清。HS (horseserum) 则是指 马血清。 6 培养细胞时应使用 5 % 或 10% CO2 ？或根 本 没 有影 响 ？ 一般 培养基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作 为pH 的缓 冲 系 统 ， 而 培养基中NaHCO3 的含量 将细 胞 培 养 应 注 意 的 问 题 --第 1页细 胞 培 养 应 注 意 的 问 题 --第 1页. ; 决定细胞培养时应使用的CO2 浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7 g 时，细胞培养时应使用10 % CO2 ；当培养基中NaHCO3 为每公升1.5 g 时， 则应使用5 % CO2 培养细胞。 7 何时须更换培养基？ 视细胞生长密度而定， 或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。 8 培养基中是否须添加抗生素？ 除于特殊筛选系统中外， 一般正常培养状态下， 培养基中不应添加任何抗生素。 9 附着性细胞继代时所使用之trypsin-EDTA 浓度？应如何处理？ 一般使...