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细胞培养应注意的问题VIP免费

细胞培养应注意的问题_第1页
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. ; 1 冷冻管应如何解冻? 取出冷冻管后, 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻, 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化, 并注意水面不可超过冷冻管盖沿, 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时, 必须注意安全, 预防冷冻管之爆裂。 2 细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除 DMSO? 除少数特别注明对 DMSO 敏感之细胞外, 绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞), 在解冻之后, 应直接放入含有 10-15ml 新鲜培养基之培养角瓶中, 待隔天再置换新鲜培养基以去除 DMSO 即可, 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 3 可否使用与原先培养条件不同之培养基? 不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基, 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基, 细胞大都无法立即适应, 造成细胞无法存活。 4 可否使用与原先培养条件不同之血清种类? 不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源 , 所 以血清的种类和品 质 对于 细胞的生长会产 生极大的影 响 。来自 不同物 种的血清, 在一些 物 质 或分子 的量 或内容 物 上都有所 不同,血清使用错 误 常 会 造成细胞无法存活。 5 何谓 FBS, FCS, CS, HS ? FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相 同的意思 , 两 者 都是指 胎 牛 血清, FCS 乃 错 误 的使用字 眼 , 请 不要再使用。CS (calf serum) 则是指 小 牛 血清。HS (horseserum) 则是指 马血清。 6 培养细胞时应使用 5 % 或 10% CO2 ?或根 本 没 有影 响 ? 一般 培养基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作 为pH 的缓 冲 系 统 , 而 培养基中NaHCO3 的含量 将细 胞 培 养 应 注 意 的 问 题 --第 1页细 胞 培 养 应 注 意 的 问 题 --第 1页. ; 决定细胞培养时应使用的CO2 浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7 g 时,细胞培养时应使用10 % CO2 ;当培养基中NaHCO3 为每公升1.5 g 时, 则应使用5 % CO2 培养细胞。 7 何时须更换培养基? 视细胞生长密度而定, 或遵照细胞株基本数据上之更换时间,按时更换培养基即可。 8 培养基中是否须添加抗生素? 除于特殊筛选系统中外, 一般正常培养状态下, 培养基中不应添加任何抗生素。 9 附着性细胞继代时所使用之trypsin-EDTA 浓度?应如何处理? 一般使...

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