网上培养caco-2经验总结VIP专享VIP免费

上海细胞生物所。还有我们实验室也有，不知道卖不卖。如果需要和我 e-mail 联系：**************** 求助：有谁培养过 HepG2细胞 和 Caco-2 细胞 吗？ 细胞, 培养, 求助细胞, 培养, 求助 欢迎您访问。 提示：游客只能阅读部份内容，请注册或者登录后继续浏览全部信息，谢谢！ 本人第一次养细胞，目标细胞是 HepG2细胞 和 Caco-2 细胞，现在在查文献，可是有不少东西都不懂，如我在网上找到的 Caco-2 细胞的培养基是 MEM,20%胎牛血清和 NEAA，这个？没有量啊，到时怎么配呢？ 请养过这两种细胞的前辈指点经验啊！我在此多多感谢了！ [ 本帖最后由 liushen 于 08-6-16 22:13 编辑 ] 版主 3# 发表于 08-6-18 16:19 | 只看该作者 MEM，胎牛血清，非必需氨基酸 欢迎您访问。 提示：游客只能阅读部份内容，请注册或者登录后继续浏览全部信息，谢谢！ MEM是一种细胞培养液，你可以去公司网站去查，有卖的。有现成的 MEM液体，也有 MEM干粉，可以自己去配制。 20%胎牛血清，就是在 MEM液体里面加入胎牛血清至终浓 度 为20%。 NEAA是非必需氨基酸吧 。我们用 的是 Gibco 公司的产 品 ，买 来 的时候 是 10 倍 浓 度 的，用 的时候 10 倍 稀 释 到培养液中 即 可。 我有養 過 用 DMEM+ FBS10% 含 PS 0.05% 然 後 用 trypsin 0.25% 去做 subculture 就可以了!很 好 養 ! Caco-2细胞培养的一点重 要经验 这个细胞对 生长 环 境 的要求非常 之 高 。除 了大 家 熟 知的培养液条 件 的苛 刻 外 （ 此不详 述 ,又 不懂的可留 言 问） ,对 生长 的空 间 问题 要求比 较 高 。 在每 一次传 代 消 化 的时候 ,要消 化 足 够 长 的时间 ,要不停 地 在镜 下 观 察 细胞的消 化 状 态 。这个细胞长 的比 较 厚 ,所以消 化 比 较 困 难 。需要耐 心 。而 消 化 的结 果应 该是保 证足 够 多的细胞都是成单 个状 态 而 不是抱 团 或者成片 。对 于这一点,常 规 消 化 是比 较 难 做 到的。所以需要采 取 点特 殊 措 施 ,我一般 是这样 做 的： 首 先 吸 干净 原 培养基,加入少量含 EDTA的胰 酶 （ 以下 简 称 YE） 润 洗 ,快 速 润 洗 完 细胞生长 面后吸 走 ,然 后加入适 量的 YE（ 我个人一般 较 常 用 量多加0.5-1ml ） ,进 ...