细菌耐药机制及检测细菌耐药机制及检测一、细菌耐药的遗传机制一、细菌耐药的遗传机制细菌耐药性的遗传学机制主要指细菌细菌耐药性的遗传学机制主要指细菌的耐药性通过基因突变的耐药性通过基因突变((即染色体介导的耐即染色体介导的耐药性药性))获得，或通过质粒或转座子水平传播获得，或通过质粒或转座子水平传播获得外源耐药性基因，也可通过整合子捕获得外源耐药性基因，也可通过整合子捕获外源基因使之转变为功能性基因来传播获外源基因使之转变为功能性基因来传播耐药性。耐药性。•11、染色体介导的耐药、染色体介导的耐药•22、质粒介导的耐药、质粒介导的耐药•33、整合子介导的耐药、整合子介导的耐药二、细菌耐药的化学机制二、细菌耐药的化学机制（一）产生灭活抗生素的各种酶（一）产生灭活抗生素的各种酶((二二))膜通透性下降膜通透性下降（三）抗菌药物作用靶位改变（三）抗菌药物作用靶位改变（四）细菌主动药物外排机制（四）细菌主动药物外排机制（五）细菌生物被膜的形成（五）细菌生物被膜的形成•几种常见的可灭活抗生素的酶几种常见的可灭活抗生素的酶11、、β-β-内酰胺酶内酰胺酶(β-lactamase)(β-lactamase)（（11）超广谱）超广谱β-β-内酰胺酶内酰胺酶(Extended-Spectrumβ-(Extended-Spectrumβ-lactamases,ESBLs)lactamases,ESBLs)（（22）头孢菌素酶（）头孢菌素酶（AmpCAmpC酶）酶）（（33）碳青霉烯酶）碳青霉烯酶（（44）金属酶）金属酶22、氨基糖苷类抗菌药物钝化酶、氨基糖苷类抗菌药物钝化酶33、、MSLMSL类钝化酶类钝化酶44、氯霉素钝化酶、氯霉素钝化酶三、当前主要的耐药性问题三、当前主要的耐药性问题革兰阳性菌：耐青霉素肺炎链球菌（革兰阳性菌：耐青霉素肺炎链球菌（PenicillinPenicillinresistantStreptococcusresistantStreptococcuspneumoniae,PRSPpneumoniae,PRSP）；耐甲氧西林葡萄球菌（）；耐甲氧西林葡萄球菌（MethicillinresistantStaphylococci,MRSMethicillinresistantStaphylococci,MRS））；耐万古霉素肠球菌（；耐万古霉素肠球菌（VancomycinresistantVancomycinresistantenterococcus,VREenterococcus,VRE）及耐万古霉素金黄色葡萄）及耐万古霉素金黄色葡萄球菌（球菌（VancomycinresistantVancomycinresistantS.aureus,VRSAS.aureus,VRSA）。）。革兰阴性菌：产超广谱革兰阴性菌：产超广谱β-β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌内酰胺酶的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌和大肠埃希菌(ESBLs)(ESBLs)；持续高产；持续高产ΙΙ型型β-β-内酰胺内酰胺酶的阴沟肠杆菌、枸橼酸杆菌等；多重耐药的铜酶的阴沟肠杆菌、枸橼酸杆菌等；多重耐药的铜绿假单胞菌、不动杆菌、嗜麦芽窄假单胞菌。绿假单胞菌、不动杆菌、嗜麦芽窄假单胞菌。对异烟肼和利福平耐药的多重耐药结核分枝杆菌（对异烟肼和利福平耐药的多重耐药结核分枝杆菌（MultidrugresistanceMycobacteriaMultidrugresistanceMycobacteriatuberculosis,MDR-Tbtuberculosis,MDR-Tb）。）。四、主要的耐药性检测方法四、主要的耐药性检测方法（一）耐青霉素（一）耐青霉素GG的肺炎链球菌（的肺炎链球菌（PRSPPRSP））筛选试验：筛选试验：1μg/1μg/片苯唑青霉素，片苯唑青霉素，MHMH琼脂琼脂+5%+5%羊血，羊血，35℃35℃含含5%CO2%5%CO2%环境中孵育环境中孵育20-2420-24小时，抑菌环直径小时，抑菌环直径≤≤19mm19mm耐药，≥耐药，≥20mm20mm敏感；确证试验：稀释法测敏感；确证试验：稀释法测定青霉素定青霉素MICMIC，，MIC≤0.06μg/mlMIC≤0.06μg/ml敏感≥敏感≥2μg/ml2μg/ml耐耐药。药。（二）耐甲氧西林的葡萄球菌（（二）耐甲氧西林的葡萄球菌（MRSMRS））（（11）纸片筛选法：含）纸片筛选法：含4%NaCl4%NaCl的的MHMH琼琼脂，脂，30μg/30μg/片头孢西丁，片头孢西丁，33-35℃33-35℃，，2424小时。小时。对于金黄色葡萄球菌，抑菌环直径≤对于金黄色葡萄球菌，抑菌环直径≤19mm19mm，为，为MRSAMRSA，抑菌环直径≥，抑菌环直径≥20mm20mm，为，为MSSAMSSA；对于；对于凝固酶阴性葡萄球菌，抑菌环直径≤凝固酶阴性葡萄球菌，抑菌环直径≤24mm24mm，为，为MRCONSMRCONS，抑菌...
