基因工程:是将目的基因或 DNA 片段与合适的载体连接转入目标生物细胞,通过复制、转录、翻译外源目的基因以及蛋白质的活性表达,使转基因生物获得新的遗传性状的操作
限制性内切核酸酶:能够识别双链 DNA 分子中的某一段特定核苷酸序列,并在此切割DNA 双链的内切核酸酶
同切点酶:又称同裂酶,是一类来源于不同微生物、能识别相同 DNA 序列的限制性内切核酸酶
同尾酶:是一类限制性内切核酸酶,它们来源各异,识别的靶序列也各不相同,但切割后能产生相同的黏性末端
酶的星号活性(Staractivity):高浓度的酶、高浓度的甘油、低离子强度、极端 pH 值等,会使一些核酸内切酶的识别和切割序列发生低特异性,即所谓的酶的星号活性现象
DNA 连接酶:是能催化双链 DNA 片段靠在一起的 3'羟基末端与 5'端磷酸基团末端之间通过形成磷酸二酯键,使两末端连接的一种核酸酶
载体:在基因克隆中能携带外源基因进入受体细胞复制、整合或表达的工具称为载体
&多克隆位点:是包含多种同一个限制性酶切点的一段很短的 DNA 序列9
a 互补:为质粒 DNA 编码 B—半乳糖苷酶的 a 亚基,宿主细胞可编码 B 亚基虽然宿主和质粒编码的片段各自都没有酶活性,但它们可以融为一体,形成具有酶学活性的蛋白质,这种互补现象叫 a 互补
黏粒载体(考斯质粒载体):是一类人工构建的含有入-DNAcos 序列和质粒复制子的特殊类型的载体
质粒:是生物细胞内固有的、能独立于寄主染色体而自主复制、并被稳定遗传的一类核酸分子12
探针:当用一个标记的核酸分子与核酸样品杂交,便可查明该样品中是否存在与该标记核酸分子具有同源性的核酸分子
这个标记的核酸分子称为探针(probe),可以是 DNA,也可以是 RNA,或合成的寡核苷酸