一 复杂样品的分离分析 引言: 随着现代科学技术的进步,尤其是分子生物学和计算机的推动,当前分析科学取得长足的进步,各种新的分析仪器和方法无论在适用性和灵敏度方面都有很大的发展.过去需要几年才能测定的蛋白质结构,现在几个小时就可以迅速测定,人类基因图谱的完全测定曙光已在眼前。采用高效毛细管色谱(包括毛细管电泳)很快分离上百个成分已不是困难的事,色谱和各种结构测定手段的在线联用,使得无论对已知化合物的在线监测,还是对未知混合物的分析能力都大为增强。目前分析化学正在生命科学、环境科学、材料科学、药物学等前沿领域发挥极大的推动作用.但是随着这些学科的不断发展,分析样品正变得越来越复杂。分析任务也变得越来越艰巨.进入21 世纪,人们将逐渐告别单一组成的分析,越来越多地面临复杂样品的分离分析,组成一结构一功能将是人们关心的焦点,复杂样品将是摆在人们面前的分析难题. 一.复杂样品分析的基本思路 复杂样品是指组分种类多、含量差别大、已知信息少.几乎为一黑箱的复杂混合物。这样的样品在生物、环境、材料中占大多数.例如中药提取物或环境污染物.来源于自然界,常常含有从无机到有机、从离子性、强极性到非极性、从小分子到大分子、从位置异构体到对映体、从常量到痕量的上百种成分,而且这些成分大都是未知的.即使是曾被发现的成分,也很难获得纯品或对照品,与大量未知物混于一体,无异于未知化食物。 复杂样品的分析,首先需要弄清组成这一样品体系的各种组成及其比例关系,了解组成这一体系的基本组分分布,在此基础上,还需对每一组成进行详细了解,如结构确定,为最终阐明组成一结构一功能提供依据(或根据组成一功能关系.先确定有效组成,再确定这些有效组成的结构).因此,对复杂样品的分离分析,可按三个层次进行研究:(1)利用高效色谱进行复杂混合物的系统分离分析,获得基本组成色谱峰及其比例关系:(2)混合物组成成分的结构鉴定,这包括离线各种光谱、质谱的综合鉴定及色谱和各种技术的在线联用,尤其是联用技术不仅可以进行快速签定,而且由于减少了处理步骤,避免了处理过程造成的组分损失,因此具有更高的定量可靠性,对含量少的组分也可以进行定性(这些含量少的组分是比较难于得到纯品的);(3)尽管高效色谱和各种光谱、质谱的联用技术可以极大地促进复杂混合物的分析,但应该看到联用技术—般要求色谱能分离获得纯色谱峰,才能较好地获得其光谱、质谱,进行较好的分析.由...