1 外周血细胞形态学检验及技巧 卫生部北京医院血液科 郑天林 卫生部临床检验中心 彭明婷 谷小林 陆红 五.血细胞形态学采样、制片染色与检查要求: ( 一 ) 采样、制片及染色,三道工序至关重要,是细胞形态学检查的成败关键。要得到合格的涂片标本,做好上述工序,应注意以下要求: 1. 采样、制片: (1) 玻 片要求:国内 1.0mm × 26mm × 76mm ± 0.5 ,美国 NCCLS 规定 1.0mm × 25mm × 75mm ± 0.5 ,要严格清洁,接近中性 . (2) 推片:选择优质推片, 推片两端 边缘整齐、平滑。也可选用有机玻璃,其大小、厚度 与坡片相同 ,两端之边缘 应加工 光滑, 以利推片用 。 (3) 采外周 血(样),擦去第一滴血,迅速采血,量适中,如绿豆粒大小,具有 一定推片技术 , 推片倾斜 45 °±,推成血膜长度 25mm ~ 35mm ,宽度 18 ~ 20mm ,血膜四周留有空隙区,血膜 终尾离玻 片终端至少 10mm ,血膜均匀,薄如蝉翼,尾端形如弧状,迅速扇(摇)干,血膜具有头、体、 尾不同 厚薄区域。此外,涂片时,还要考虑患者的血液状态,如贫血程度、血液粘稠度、 WBC 或有核细胞多少等因素, 调整推片技巧 。 (4) 如若采用静脉血推片,用 K 3 -EDTA 或肝素抗凝, 推制血 片应尽早进行(最迟在 1 ~ 2 小时内)。 (二)染色:是识别细胞形态的重要标记工序: 常规瑞氏 - 姬姆萨染色要点: 1 .要得到满意、漂亮的血细胞染色标本,新鲜涂片迅速染色是很重要的。 2 .染色液配制要合格; 3 .涂片切勿用甲醛固定,否则不着色; 4 .染色的好坏与染色液、缓冲液的质量及比例、加液间隔时间、保持 玻 片染色液面的张力等染色技巧均有重大关系。染液要覆盖涂膜面,再加缓冲液( 1:2 ),其量要充足、混均,染色时间要 30 分钟以上。 5 . 细胞着色的观察: (1) 当染液与缓冲液混合后,甲醛吸水液温升高,发生剧烈反应,直至液膜表面的“染色粒”呈均匀分布,随染色时间的推延,“染色粒”由“染色小粒”聚集成“染色大粒”,逐渐由外缘向内缘推进至 染色面 中心(此过程需要 20-30 分钟以上),则表明细胞着色已完成, (2) 再用自来水缓流冲洗,使染色液沉渣及染色粒浮去,使其充分起分色作用,去除细胞染色中浮色,显示出胞核结构及细胞清晰形态,待干,镜检。 六.外周血细胞形态检查技巧: 外周血中三种血细胞数与形态学表现是: ● 反映...