鸡抗体检测培训VIP免费

禽流感及新城疫抗体检测操作神木市畜牧业发展中心王建兵1检测背景2检测原理3检测准备4检测操作5检测判定6注意事项禽流感：是由禽流感病毒引起的一种禽类（家禽和野禽）的烈性传染病，被世界动物卫生组织（OIE)定为A类传染病。禽流感病毒感染后，呈现出较严重的全身性、出血性、败血性症状，死亡率较高。禽流感病毒不仅能引起禽类严重的疾病，而且对人类和哺乳类动物也能造成感染。为了有效预防和控制该病的发生和流行，农业部要求对所有家禽和人工饲养的鹌鹑、鸽子等进行高致病性禽流感强制免疫。检测背景新城疫：俗名鸡瘟，是由副bai黏病毒引起的一种急性高度接触性烈性传染病。主要du以20～50日龄的肉鸡zhi多发，鸡群精神沉郁、食欲减少至废绝，体温升高，常甩头发出“咯咯”声，拉黄绿色不成型稀粪，开始出现零星鸡只瘫痪，两天后表现肌肉震颤、病鸡嗉囊积液。病程一般为5～7天，康复后出现歪颈、观星等神经症状。二类疫病，强制免疫检测背景血凝试验血凝抑制试验检测原理许多病毒表面有血凝素，能与鸡豚鼠人等红细胞表面受体结合，从而出现红细胞凝集现象，称为病毒的血凝现象。血凝血凝抑制当病毒与相应的抗病毒抗体结合后，能使得红细胞的凝集现象受到抑制，称为病毒血凝抑制现象。红细胞表面的受体可以和病毒的血凝素结合。—受体血凝素红细胞病毒病毒和红细胞不断结合在一起，肉眼看到的是红细胞凝集到了一起。发生血凝。病毒病毒红细胞红细胞红细胞当出现抗体时，抗体和病毒发生特异性结合，形成病毒抗体复合物。从而抑制了病毒与红细胞的结合。病毒抗体红细胞在一定的病毒和红细胞中，当抗体含量充足时，红细胞完全不凝集。最后沉积在液体底部。病毒抗体复合物红细胞当抗体含量不足时，可发生部分凝集反应。以此来判断抗体的含量。病毒抗体复合物红细胞红细胞未经免疫的成年公鸡（公鸡红细胞较大）生理盐水新城疫禽流感病毒抗原待测血清90o微量血凝板振荡器离心机移液器及枪头等检测准备1%鸡红细胞悬液的制备备好的公鸡翅下采血，将鸡血5毫升转到10毫升离心管中，再加入生理盐水，颠倒混匀，2000转/分离心3-4分钟，离心后弃去上清液。如此反复3到4次，至上清液清晰。最后离心后弃上清液。容量瓶中加入99毫升生理盐水，用移液枪吸取1毫升红细胞，加入到容量瓶中备用。检测准备1.在v型微量反应板中，每孔加25微升生理盐水。2.第1孔加25微升抗原，反复抽打3-5次混匀。3.从第1孔吸取25微升抗原加入第2孔，混匀后吸取25微升加入第3孔，如此进行对倍稀释至第11孔，从第11孔吸取25微升弃去。血凝试验操作4.每孔加25微升生理盐水。5.每孔加入25微升1%鸡红细胞悬液。6.将反应板在振荡器上震荡1-2分钟或轻扣反应板混合反应物，在室温（20-25℃）下静置20-30分钟或2-8℃45-60分钟。血凝试验操作将反应板倾斜60度，观察红细胞有无泪珠状流淌，完全无泪珠样流淌（100%凝集）的最高稀释倍数为血凝效价。结果判定完全凝集在A8，其稀释倍数为28，所以血凝效价为1：256.1.抗原稀释液制作即在1毫升抗原里加入63毫升盐水血凝抑制试验操作641425612.在v型微量反应板中，1-11孔每孔加25微升生理盐水。12孔加入50微升盐水3.第1孔加25微升待检血清，反复抽打3-5次混匀。G1H1分别加入阴阳性血清。4.从第1孔吸取25微升待检血清加入第2孔，混匀后吸取25微升加入第3孔，如此进行对倍稀释至第10孔，从第10孔吸取25微升弃去。血凝抑制试验操作5.1-11孔，每孔加25微升抗原稀释液。6.将反应板在振荡器上震荡1-2分钟或轻扣反应板混合反应物，在室温下静置30分钟。7.每孔加入25微升1%鸡红细胞悬液。血凝抑制试验操作8.将反应板在振荡器上震荡1-2分钟或轻扣反应板混合反应物，在室温20-25℃下静置20-30分钟。血凝抑制试验操作病毒对照发生凝集；空白对照无自凝；阴性对照血清抗体效价不高于1：4；阳性对照血清抗体效价误差在1个滴度。完全符合上述四个条件，判断为试验成立。结果判定血凝抑制试验，反应板倾斜后，红细胞发生流淌，为不凝结，不发生流淌，为凝集。被检样品HI效价≤1:4判...