常用生化试剂作用VIP免费

常用生化试剂作用： 1、蛋白酶 K：能水解消化蛋白质，特别是与 DNA 结合的组蛋白，在尿素和 SDS 中稳定。一般工作浓度是 50—100μg/ml，推荐反应缓冲液：50mM Tris -HCl （pH7.5）,10mM CaCl2。 2、SDS：十二烷基硫酸钠，溶解细胞膜上的脂类与蛋白质，因而溶解膜蛋白而破坏细胞膜，并解离细胞中的核蛋白，SDS 还能与蛋白质结合而沉淀。 3、IPTG：异丙基-β-D-硫代半乳糖苷， 常用于蓝白斑筛选及 IPTG诱导的细菌内的蛋白表达等。IPTG 和乳糖的结构相似，所以它和乳糖一样，可以与乳糖操纵元的阻遏蛋白结合，使阻遏蛋白的空间构像变化，四聚体解聚成单体，失去与操纵子特异性结合的能力，从而解除了阻遏蛋白的作用，使其后的基因得以转录合成利用乳糖的酶类。与乳糖不同的是，IPTG 不被 β-半乳糖苷酶水解。常与 X-GAL 一起用于蓝白斑筛选。作用极强的诱导剂，不被细菌代谢而十分稳定。 4、X-gal：5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷，是 IPTG 的显色试剂，在 IPTG 的催化下显蓝色。常跟 IPTG 一起用与蓝白斑筛选。 5、G418：一种抗生素，对几乎所有的细胞都有毒性，是稳定转染最常用的选择试剂。当 neo 基因被整合进真核细胞基因组合适的地方后，则能启动 neo 基因编码的序列转录为 mRNA，从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达，使细胞获得抗性而能在含有Ｇ418 的选择性培养基中生长。Ｇ418 的这一选择特性 ，已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。 6、DMSO：二甲基亚砜。实验室常用于作液体层析溶剂，同时用作测试物质紫外消光值上时用作参照物。能溶于所有烷烃和烯烃。 7、曲拉通 X-100：TritonX-100，用的细胞裂解液成分之一，在保护蛋白活性方面有一定作用， 能力介于 NP40 和 SDS 之间，偏向于NP40。 8、NP-40：很温和的去垢剂，1%浓度的基本可以破坏掉胞膜，而对核膜破坏的作用弱，结合特定的 bu ffer 可以获得胞浆蛋白。 9、BSA：牛血清白蛋白， 主要起维持渗透压作用、PH 缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中，添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。常用于蛋白定量中的内参和抗体稀释液。 10、甲酰胺： 甲酰胺被用作凝胶电泳中 RNA 的稳定剂，也用于稳定毛细管电泳中的变性单股 DNA。 11、TEMED：四甲基乙二胺。促凝剂。在中性及碱性 pH 条件下，加入 TEMED 可加速凝胶聚合。 12、巯基乙醇：一种强还原...