植物病毒检测技术研究进展汇总VIP专享VIP免费

- 1 - 植物病毒检测技术研究进展刘茂炎摘要 ：随着现代技术的发展特别是分子技术的发展，鉴定和检测病毒的方法越来越多，也越来越精确快速。以PCR 为基础的基因工程技术已经广泛应用于病毒核酸分子的鉴定，其高灵敏度和高特异性是与PCR 扩增反应的特异性引物相关联的； 于此同时传统的鉴定检测技术依然有其发展优势。不论怎样的方法技术，都是以病毒的理化性质以及侵染性为基础的。在此基础上， 甚至出现了某些边缘技术在病毒鉴定检测方面的应用。本文主要综述的是对植物病毒鉴定检测技术的研究进展。关键词 ：植物病毒；检测技术；PCR 病毒在生物学上特征（如病毒的理化性质，包括病毒粒子的形态、大小、对理化因子的耐受性等）以及在寄主上的反应（如寄主范围、症状表现、传播方式等）是对病毒最直观的认识。 常规的对植物病毒的鉴定检测方法有：生物学测定方法、血清学技术、电子显微镜技术、分子生物学技术等。生物学测定依据病毒的侵染性， 观察寄主植株或其它生物的症状表现；血清学技术以病毒外壳蛋白(CP)为基础；电子显微镜技术依据病毒的形状大小的不同；分子生物学鉴定则以病毒核酸为基础。1. 生物学鉴定最直接的方法是目测法， 直接观察病毒对植物的病害症状。如烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus，TMV ），病害症状为叶上出现花叶症状，生长陷于不良状态，叶常呈畸形；玉米鼠耳病的诊断主要依据田间症状表现[1]。目测法因观察的主观性和症状的不确定性的影响而不精准。1929 年美国病毒学家霍姆斯（Holmes） 用感病的植物叶片粗提液接种指示植物，2~3 天后接种叶片出现圆形枯斑，枯斑数与侵染性病毒的浓度成正比，能测出病毒的相对侵染力， 对病毒的定性有着重要的意义，这种人工接种鉴定的方法就是枯斑和指示植物检测法。国内报道的水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf fijivirus，RBSDV)可侵染28 属 57 种禾本科植物，该病毒的主要传毒介体是灰飞虱(Laodelphax striatella)，- 2 - 玉米是灰飞虱的桥梁寄主而非最适寄主[2]，以玉米作为指示植物可以良好地鉴定RBSDV。目前接种鉴定的方法主要有四种：粉風接种鉴定、 嫁接接种鉴定、 农杆菌接种鉴定、基因枪轰击法接种鉴定 (叶青静等 ,2009)。后两种鉴定方法涉及到了分子克隆技术， 是传统方法与基因工程技术的结合。用农杆菌接种法将番茄黄化曲叶病毒 (Tomato yellow leaf curl virus disease, TYLCD ) 导入叶盘和整个植株 ,TY...