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PCR基本原理示意图待扩增目的DNA片段(红色区域)氢键3’5’3’5’加热变性后氢键被破坏,模板分成两条单链。5’5’3’3’加热变性5’5’3’3’退火(迅速降温)退火后,由于引物分子小,浓度又高,在模板之间还未复性前就迅速与模板匹配结合。5’5’3’3’引物2引物1引物是人工设计并合成的脱氧核苷酸短链。5’5’3’3’引物2引物1升温至Taq酶最适温度3’3’新链延伸方向总是从5’→3’在Taq酶最适温度下,新链合成,不断延伸;在终止延伸时,新链的长度可能长于目的片段,延伸至目的片段外侧区域。升温至Taq酶最适温度在Taq酶最适温度下,新链合成,不断延伸;在终止延伸时,新链的长度可能长于目的片段,延伸至目的片段外侧区域。5’5’3’3’引物2引物13’3’5’5’新链延伸方向总是从5’→3’变性温度下链间氢键又被破坏,双链分开成单链。5’3’3’再次升温至变性温度5’5’3’3’退火后,引物又与模板匹配结合。5’5’3’3’退火(迅速降温)5’5’3’3’引物1引物1引物2引物2注意引物与模板匹配的位置在Taq酶最适温度下,新链合成,不断延伸。新链的长度不会超过模板。5’5’3’3’升温至Taq酶最适温度5’5’3’3’引物1引物1引物2引物25’新链延伸方向总是从5’→3’反复经过变性、退火、延伸等步骤,经过约30~40次循环,下面这种产物将以指数级方式递增,成为主要产物。5’3’5’3’难点?!!在PCR循环过程中,以下双链形式的DNA只能以算术级方式扩增。成为PCR反应的副产物。5’5’5’5’难点?!!

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