下载后可任意编辑最新国家开放大学电大《植物生理学》形考任务 4 试题及答案 最新国家开放大学电大《植物生理学》形考任务 4 试题及答案形考作业 4提交实验报告植物生理学实验报告实验题目叶绿素 a、叶绿素 b 含量测定日期班级姓名【实验目的】熟悉在未经分离的叶绿素溶液中测定叶绿素 a 和叶绿素 b的方法及其计算【实验原理】•叶绿素提取液中同时含有叶绿素 a 和叶绿素 b,二者的吸收光谱虽有不同,但又存在着明显的重叠,在不分离叶绿素 a 和叶绿素 b 的情况下同时测定叶绿素 a 和叶绿素 b 的浓度,可分别测定在 663nm 和645nm(分别是叶绿素 a 和叶绿素 b 在红光区的吸收峰)的光吸收,然后根据Lambert-Beer 定律,计算出提取液中叶绿素 a 和叶绿素 b 的浓度。 •A663=82.04ρa+9.27ρb(1)•A645=16.75ρa+45.60ρb(2)•公式中ρa 为叶绿素 a 的浓度,ρb 为叶绿素 b 浓度(单位为 g/L),82.04 和 9.27 分别是叶绿素 a 和叶绿素 b 在 663nm 下的比吸收系数(浓度为 1g/L,光路宽度为1cm 时的吸光度值);xxxx 下的比吸收系数。即混合液在某一波长下的光吸收等于各组分在此波长下的光吸收之和。 将上式整理,可以得到下式: •ρa=0.0127A663-0.00269A645(3)•ρb=0.0229A645-0.00468A663(4)将叶绿素的浓度改为 mg/L,则上式变为: •ρa=12.7A663-2.69A645(5)•ρb=22.9A645-4.68A663(6)•ρT=ρa+ρb=8.02A663+20.21A645(7)•ρT 为叶绿素的总浓度【实验器材】1、实验仪器:分光光度计、离心机、天平、剪刀、研钵、漏斗、移液管 2、实验药品:丙酮、碳酸钙 3、实验材料:植物叶片:①陆生花生:水生花生②小叶黄杨新叶:小叶黄杨老叶【实验步骤】1、色素的提取取新奇叶片,剪去粗大的叶脉并剪成碎块,称取 0.5g 放入研钵中加纯丙酮 5ml,少许 CaCO3和石英砂,研磨成匀浆,再加 80%丙酮 5ml,将匀浆转入离心管,并用适量 80%丙酮洗涤研钵,一并转入离心管,离心 5min 后弃沉淀,上清液用 80%丙酮定容至 20ml。 1下载后可任意编辑 2、测定 OD 值取上述色素提取液 1ml,加 80%丙酮 4ml 稀释后转入比色杯中,以 80%丙酮为对比,分别测定 663nm、645nm 处的 OD 值。 4、计算按式(5)、(6)、(7)分别计算色素提取液中叶绿素、叶绿素及叶绿素的浓度。再根据稀释倍数分别计算每克鲜重叶片中色素的含量。 【实验结果】水花生(陆生)水花生...