免疫学技术的迅速发展对精度的要求越来越高,一般的酶免检测技术已逐渐无法适应这种形势的需要
现今发展的主流已不再是用放射性同位素标记的测定方法(避免污染环境及对人体损害),而是转向于能在任何地方操作的快速均相和固相测定,最终趋向于能够枪测到皮克或10负18摩尔级的、非同位素的、自动或半自动的实验室测定技术,发光免疫分析技术顺应了这一潮流,开创了免疫诊断的新纪元
发光免疫分析是一种灵敏度高、特异性强、检测快速及无放射危害的分析技术
70年代末以来得到了迅速发展,目前在国际上已经实现商品化和产业化的发光免疫分析产品,基本上可以分为:化学发光、时间分辨荧光(也称时间延迟光致发光)、电化学发光(也称场致发光和电致发光)几种
1、化学发光 化学发光是指在化学反应过程中发出可见 光的现象
通 常 是指有 些 化合 物 不经紫 外 光或可见 光照 射,通 过吸 收 化学能(主要为氧 化还原 反应),从 基态 激 发至 激 发态
退 激 时通 过跃 迁 (或将 激 发能转移 至 受体分子 上),释 放能量 产生 光子 ,以光形式 放出能量 从 而导 致的发光现象
其 主要特点 为消 耗 发光剂
同时量 子 效 率 相对较 低
1 按 化学反应类 型 分类 :可分为酶促 化学发光和非酶促 化学发光两 类
其 中酶促 化学发光主要包 括 辣 根 过氧 化物 酶(HRP)系 统 、碱性磷 酸 酶 (ALP)系 统 、黄 嘌 呤 氧 化酶系 统 等
酶促 发光的共 同特点 为发光过程中作为标记物 的酶基本不被 消 耗 ,而反应体系 中发光剂 充 分过最 , 因 此 发 光 信 号 强 而 稳 定 , 且 发 光 时 间 较 长
因 此 可 采 用 速 率 法 测 量 ,故 检 测 方 式 简 单 、 成 本 较 低
酶 促 反 应 的 主 要 缺 点 为 工 作 曲