乙型肝炎病毒表面抗原试剂盒性能验证方案

乙型肝炎病毒表面抗原试剂盒性能验证方案报告人：批准人：时间 ：时间：宿迁市中医院检验科1目 录一、 系统信息二、 验证目的三、 检测原理四、 验证过程五、 验证结果六、 验证结论七、 参考文献八、 附件2一、系统信息项目名称：乙型肝炎病毒表面抗原（酶联免疫法）设备名称及型号：AutoBio phomo 酶标仪/Anthos fluido 洗扳机试剂名称：乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）批号：201610402有效期：20171024厂商：上海科华生物工程股份有限公司质控品名称：康彻思坦 HBsAg 质控品 0.2IU/ml批号：201611007有效期：20181121厂商：北京康彻思坦生物技术有限公司二、验证目的验证 HBsAg 检测性能是否满足临床要求。三、检测原理采用抗－HBs 包被反应板，加入待测样本，经孵育后，加入抗－HBs-HRP，当样本中存在 HBsAg 时，该 HBsAg 与包被抗－HBs 结合并与抗－HBs-HRP 结合形成抗－HBs-HBsAg-抗－HBs-HRP 复合物，加入 TMB 底物产生显色反应，反之则无显色反应。四、验证过程4.1 批内精密度选择康彻思坦 HBsAg 0.2IU/ml 浓度质控品，在一批检测内，重复检测 10 次（孔），计算所得 S/CO 值的均值和 SD，计算批内 CV%。判断结论：批内精密度变异 CV%应≤15%。4.2 检测结果符合率4.2.1 按要求选择样品进行验证选取至少 40 例样本，结果为阴性和阳性的样品各 20 例，按常规样本检测程序进行检测，结果按下列公式进行计算，得到阴/阳结果符合率：敏感性：被测试剂盒测定真阳性数/(真阳性数+假阴性数)*100%特异性：被测试剂盒测定真阴性数/（真阴性数+假阳性数）*100%符合率：被测试剂盒测定（真阳性数+真阴性数）/（真阳性数+假阴性数+真阴性数+假阳性数）*100%4.2.2 结果判断：敏感性=100%；特异性=100%；符合率=100%4.3 检出限验证4.3.1 选取一个已知浓度的定值质控，按原倍、 1:1 、1:2 、1:3、1：4、1：5……等稀3释倍数进行稀释，将稀释后的系列样本按常规样本的检测程序进行检测，寻求 S/CO 最接近 1 但大于 1 的稀释度。如果稀释样本 S/CO 结果大于 1，则继续增加稀释倍数做检测。将 S/CO 结果接近 1 的稀释度的样本作 20 次重复测试，如果 95%以上的结果都大于 1，则可将该稀释度对应样本的浓度当做检出限浓度。4.3.2、根据上述系列样本中结果为阳性时最大稀释倍数计算其检出限，具体公式如下：检出限=原始样本浓度/结果为阳性时的最大稀释倍数五、验证结果验证指标精...