单克隆抗体技术二、动物细胞融合细胞A细胞B杂种细胞灭活的病毒物理法化学法仙台病毒疱疹病毒新城鸡瘟病毒用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程细胞核病毒颗粒细胞核不同种类的动物细胞之间融合人与动物细胞之间融合植物细胞杂交与动物细胞杂交的比较比较项目原理方法诱导手段用途植物动物细胞膜流动性去壁原生质融合细胞分散细胞融合物理化学物理化学生物克服远缘杂交不亲合制备单克隆抗体读下面一段文字资料,思考以下问题:长期以来,为了获得抗体,采用的是把某种抗原反复注射到动物体内,然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体,不仅产量低,而且抗体的特异性差,纯度低,反应不够灵敏。人们发现,在动物发生免疫反应的过程中,体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体,但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体,必须用单个B细胞进行无性繁殖,即克隆。1、请从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念2、怎样才能获得单克隆抗体?提示1:仅用细胞培养技术可行吗?提示2:我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的?提示3:有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢?用单个B细胞进行克隆,得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体,这种抗体就叫做单克隆抗体。单克隆抗体制备过程注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选,继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体思考:1、本过程利用了哪些原理?免疫原理,细胞融合原理和动物细胞培养原理2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合?这样融合成的杂交瘤细胞,继承了双亲细胞的遗传物质,不仅具有B细胞分泌抗体的能力,而且还有无限增殖的本领,因而可以获得大量单克隆抗体单克隆抗体的应用与常规抗体相比,单克隆抗体产量高,特异性强,灵敏度高,优越性十分明显。应用主要有:1、临床诊断2、作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”治疗肿瘤资料:目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病,用单克隆抗体作为诊断手段,是一个必然趋势。另外,用单克隆抗体做体内诊断,借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们的注意,目前,主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌的实验方案2、该方案能达到预期效果吗?为什么?4、图中B为________过程,常用_________作为诱导剂,该细胞继承___________的遗传特性,既能__________,又能___________。1、该实验方案的目的是__________3、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______5、C过程指细胞培养,该过程包括_____培养和_____培养两个阶段,其中_____代以内的的细胞属于细胞株。制备单克隆抗体B细胞抗体细胞融合灭活病毒双亲细胞分泌抗体无限增殖原代传代50B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC疫苗和抗体的研制,是生物技术发展的永恒主题。目前在美国单克隆抗体类药物已占FDA所批生物药的3/4。•美国已上市16种单克隆抗体药物•2002年销售额29亿美元•2005年90亿美元•我国的单克隆抗体药物市场还处于起步阶段,更谈不上抗体组药物的发展。抗体攻击病毒抗体攻击病毒凝凝集集细细菌菌抗抗SARSSARS的的单单抗抗SARS-CoVSARS-CoV抗体是对其抗原有极强专一性的抗体是对其抗原有极强专一性的魔弹或巡弋飞弹魔弹或巡弋飞弹研究研究以免疫转印法检测以免疫转印法检测特定抗原特定抗原医疗医疗以毒素连结抗体攻击以毒素连结抗体攻击病变細胞病变細胞检验检验以以ELISAELISA侦测侦测特定特定病原体病原体抗体药物销售趋势图抗体药物销售趋势图生物技术生物技术生物技术制药生物技术制药基因工程药物(蛋白类药物)基因工程药物(蛋白类药物)人源化治疗性单克隆抗体药物人源化治疗性单克隆抗体药物基因治疗技术基因治疗技术现代中药现代中药●●至至20002000年底,在美国药品市场上生物技术年底,在美国药品市场上生物技术药物有药物有7676种,其中抗体药物...