干细胞内毒素检测标准操作规程SOP-ZK-003

GMP 质量管理文件编号：SOP/ZK/003干细胞内毒素检测标准操作规程（SOP）北京赛托森生物科技发展有限公司质量管理第 1 页 共 9 页GMP 质量管理文件编号：SOP/ZK/003干细胞内毒素检测标准操作规程文件名：干细胞内毒素检测标准操作规程制定人：审核人：批准人：文件编号：日期：年月日文件类型：工作标准日期：年月日版次：第一版日期：年月日印数：共5 份生效日期：年月日颁发部门：质量管理分发至： 质量副总经理、质量管理部、QC 检验室、综合办公室修订号变更记载修订人批准日期生效日期原 因 及 目 的1.简述本操作程序主要参照 BP 2003 Appendix XIV C. Test for bacterial endotoxins中MethodA.Gel-clot method: limit test和Method B. Gel-clot method: semi-quantitativetest以及《中国药典2010版附录ⅹⅡE 细菌内毒素检查法》中凝胶法，结合实验室自身条件编写而成。2.安全注意事项由于细菌内毒素对人体有毒害作用，且鲎试剂对人的危害作用尚不明确。因此实验过程中一定要做好防护措施。3.检验目的检验供试品中的的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定。4.检验原理本操作程序通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来定性检测或半定量检测内毒素。5.供试品溶液的制备某些供试品需进行复溶、稀释或在水性溶液中浸提制成供试品溶液。一般要求供试品溶液的 pH 值在6.0～8.0 的范围内。对于过酸、过碱或本身有缓冲能力的供试品，需调节被测溶液（或其稀释液）的pH 值，可使用酸、碱溶液或适宜的缓冲液调节pH 值。酸或碱溶液须用细菌内毒素检查用水在已去除内毒素的容器中配制。缓冲液必须经过验证不含内毒素和干扰因子。6.供试品细菌内毒素的限值(L)药典有明确规定的按照药典规定值，如无规定需经计算得出，具体计算方法见各药典。7.供试品最大有效稀释倍数(MVD)和最小有效稀释浓度的确定(MVC)第 2 页 共 9 页GMP 质量管理文件编号：SOP/ZK/003最大有效稀释倍数是指在试验中供试品溶液被允许达到稀释的最大倍数( 1→MVD)，在不超过此稀释倍数的浓度下进行内毒素限值的检测。用以下公式来确定MVD，MVD=cL/λ。式中L 为供试品的细菌内毒素限值；c 为供试品溶液的浓度，当L 以EU / ml 表示时，则c 为1ml/ ml ，当L 以 EU / mg或 EU / U表示时，c 的单位需为mg / ml或 U / ml。如供试品为注射用无菌粉末或原料药，则MVD 取 1 ，可计算供试品的最小有效稀释...