FISH 简介 荧光原位杂交(Fluorescence In Situ Hybridization, 简称 FISH)由于其直观, 快速, 敏感性高和方便灵活越来越得到广泛应用, 尤其是在血液学领域中
因为白血病标本比较容易取得和制备, 不同类型的白血病又往往有其特异的染色体异常, FISH 在白血病诊断, 治疗监测, 预后估计和微小残留病检测等诸方面都正成为不可缺少的重要手段
FISH 的基本原理很简单, 就是标记了荧光的单链 DNA(探针)和与其互补的 DNA(玻片上的标本)退火杂交, 通过观察荧光信号在染色体上的位置来反映相应基因的情况
FISH 探针按标记方法可分为直接标记和间接标记: 用生物素(biotin)或地高辛(digoxingenin)标记称为间接标记, 杂交后需要通过免疫荧光抗体检测方能看到荧光信号, 因而 步骤较多, 操作麻烦, 其优点是在信号较弱或较小时可经抗原抗体反应扩大; 直接用荧光素标记 DNA 的方法称为直接标记
由于直接标记的探针杂交后可马上观察到荧光信号, 省去了烦琐的免疫荧光反应, 不再需要购买荧光抗 体, 也由于近年来荧光互的亮度和抗淬灭性的不断改进和提高, 直接标记的荧光探针越来越成为首选, 采用多种不同颜色的荧光, 方便在同一标本上同时检测多钟异常
其荧光强度 和信号大小都易于在普通荧光显微镜下观察, 操作过程中也不需要严格避光, 使FISH 过程变得简便而易于操作
FISH 并不能取代传统的白血病 MCI 诊断, 但它却能使MIC 分型更为准确和深入
, MIC 即细胞形态 学(M), 免疫学和细胞遗传学(C), 三者结合对白血病进行分型诊断, 对不同类型的白血病采用不同治疗方案手段
随着人们对白血病的不断认识, 仅进行MIC 分型不够全面, 还要加上对白血病的分子(M)诊断, 成为 MICM 分型
